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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 糖元染色試劑盒
貨號(hào) | FS-X9848 |
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產(chǎn)品介紹:
過是氧化劑,使含有乙二醇基(-CHOH-CHOH)的多糖類物質(zhì)(糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等)氧化,形成雙醛基(-CHO-CHO)。醛基與雪夫試劑中的無色品紅結(jié)合,使無色的品紅變成紫紅色化合物,定位于含有多糖類的細(xì)胞內(nèi)。 儲(chǔ)存條件:2-8℃避光保存。 有效期:六個(gè)月。 |
中文名稱:糖元染色試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:200ml
貨號(hào):FS-X9848
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
17b-hydroxyandrost-4-ene-3-...英文名: OxaliplatinCD163蛋白樣1抗體包裝1mg
17α-Methyltestosterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Oxiconazole Nitrate周期依賴性激5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體包裝1g
1,3-(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Oxytetracycline HCl22號(hào)染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg
1,6-二氫-2-基-6-氧代-(3,4’-二吡啶)...英文名: Oxytetracycline HCl分裂周期37樣蛋白1抗體包裝1g
2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Oxytocin Acetate羧肽X(M14家族1)抗體包裝250mg
2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Paclitaxel卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體包裝100g
2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Paclitaxel跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體包裝25g
2,3-丁二(標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))英文名: Palonosetron HCl分子伴侶CESK1蛋白抗體包裝500g
2,3-二氫-6-基咪唑【2,1-b】噻唑鹽鹽(鹽...英文名: Paromomycin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體包裝5g
2,6-二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Paromomycin SulfateCDK5激活結(jié)合蛋白1抗體包裝100g
2,6-二基酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pazufloxacin Mesilate磷化表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體包裝25g
2-(4-異丁?;?biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pazufloxacin Mesilate腫瘤/抗原1B/1A包裝25g
2-基-4-酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pefloxacin mesylate dihydrate磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
2-乙酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗體包裝1g
2-單硝異山梨酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pemetrexed Disodium免疫球蛋白超家族成員16抗體包裝250mg
紅曲霉(斜面)Monascus anka 質(zhì)量規(guī)格:>95%血小板相關(guān)免疫球蛋白試劑盒亞麻木酚;Secoisolaricir
白鮑魚菇Pleurotus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥595 µg/mg,BR血小板相關(guān)抗體IgM試劑盒氧化苦亮葉耳環(huán)根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定血小板生成自身抗體試劑盒野黃芩;Scularin
糖元染色試劑盒扭曲毛殼 2-氨基-3-甲甲酯同型半胱
*蛹蟲草 (R)-(+)-1-(4-甲氧基苯)乙3-羧基-4-甲基-5-基-2呋喃
米曲霉 N,N-二(4-基)苯ESRI 抗體
釀酒酵母 3,5-二叔丁基苯致癌物質(zhì)
釀酒酵母 還原桃紅R致癌物質(zhì)
泡盛曲霉 2--5-甲基噻吩蛋白磷脂
赭黃裸傘 3-氧代環(huán)丁烷基羧天門冬酰
沙漠奇異球 三乙酰基-β-環(huán)糊精血管緊張轉(zhuǎn)化抑制劑
大腸埃希 3,4-(亞甲二氧)肉桂階段特異性胚胎表面抗原4
乳桿屬 1,2-二溴-4-氟苯表皮生長(zhǎng)因子受體-T790M
枯草芽孢桿 6-吡-2-羧血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165
旋柄腐霉 2-氟苯肼V Leiden
枯草芽孢桿 8-氨基異喹啉凝血原20210A
巴氏醋桿 6-氨基異喹啉弓蛔蟲
熱帶頭梗霉 屈西多巴神經(jīng)調(diào)節(jié)-1
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