產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱(chēng)：永生型大鼠肝儲(chǔ)脂細(xì)胞    

產(chǎn)品英文：HSC-T6

貨號(hào)：FS-01X9714

細(xì)胞培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報(bào)告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫   

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human Collagen Type Ⅳ，Col Ⅳ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human Collagen Type Ⅲ，Col Ⅲ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人層連蛋白/板層(LN)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human Laminin，LN ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human Fibronectin，F(xiàn)N ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human ovalbumin specific IgG，OVA sIgG ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human granulocyte specific antinuclear antibody，GS-ANA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human Blocking antibody，BA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human ovalbumin specific IgE，OVA sIgE ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human anti-neutrophil granules antibody，ANGA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human anti-apolipoprotein A1 antibody，Apo A1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗胰島受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human anti-insulin receptor antibody，AIRA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human anti-centrol and centrosome antibody，ACA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human anti-albumin antibody，AAA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗環(huán)胍抗體(CCP)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human anti-cyclic citrullinated peptide，CCP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human anti-perinuclear factor，APF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human anti-Actin antibody，AAA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human heparin associated antibody，HIT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human anti-glycoprotein antibody，GP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
永生型大鼠肝儲(chǔ)脂細(xì)胞MAGEF1  黑色瘤抗原F蛋白家族1抗體規(guī)格: 0.2ml

Msx2/Hox8  同源盒基因Msx2抗體規(guī)格: 0.2ml

NMT2  肉豆蔻?；D(zhuǎn)移2-N端抗體規(guī)格: 0.2ml

DOK3  對(duì)接蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

NRG3  神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

OTUB  泛特異性蛋白Otubain2抗體規(guī)格: 0.2ml

PRR11  富含蛋白11抗體規(guī)格: 0.2ml

S100A7/Psoriasin  S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體規(guī)格: 0.2ml