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貨號 | FS-X10203 |
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中文名稱:蕨類保色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50ml
貨號:FS-X10203
產(chǎn)品介紹:
用途: 用于液體浸制蕨類標本的制作。用于蕨類標本的保色。 注意事項: 主要由硫酸銅等組成。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
球毛殼DNA結(jié)合抑制因子2抗體Human TNFAIP8L2 大鼠趨化因子9(CXCL9)免疫試劑盒
圣堡羅沙門氏菌粒趨化蛋白2抗體Human TNIP1 大鼠趨化因子(FK)免疫試劑盒
新疆鹽地桿菌GATA結(jié)合蛋白5抗體Human TNK1 大鼠清淀粉樣蛋白P(SAP)免疫試劑盒
短桿狀馬賽菌生長分化因子9抗體Human TNIP2 大鼠清除受體富含半胱1型蛋白M130/CD163分子,CD163 免疫試劑盒
博斯氏菌屬促代謝型谷受體4抗體Human TMEM54 大鼠(HYD)免疫試劑盒
戊糖片球菌GST標簽蛋白抗體Human TMEM55B 大鼠羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒
短小芽胞桿菌磷脂?;鞍拙厶?/span>-4抗體Human TMEM59 大鼠羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌眼鏡蛇蛇蛋白抗體Human PMCHL1(Putative pro-MCH-like protein 1) 大鼠羥脯(Hyp)免疫試劑盒
勒仔樹根瘤菌GalNAc-T14抗體Human TMEM70 大鼠強啡肽(Dyn)免疫試劑盒
微桿菌屬骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白2抗體Human TMEM77 大鼠潛伏轉(zhuǎn)化生長因子結(jié)合蛋白1(LTBP1)免疫試劑盒
曲霉甘油?;D(zhuǎn)移4抗體Human TMEM87A 大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒
Chryseobacterium葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白12抗體Human TMEM9 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)免疫試劑盒
油菜假單胞菌顆粒溶抗體Human TMEM98 大鼠前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母腦膠質(zhì)瘤相關蛋白抗體(鋅指蛋白5)Human TMEM9B 大鼠前列腺H2(PGH2)免疫試劑盒
黑曲霉生長調(diào)節(jié)致癌基因gamma(GROγ)抗體Human TMF1 大鼠前列腺F合成(PGFS)免疫試劑盒
弗蘭克氏菌G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human MCHR1(Melanin-concentRating hormone receptor 1) 大鼠前列腺F2α受體(PTGFR)免疫試劑盒
肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:SP桑根C
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:核磁共振定量標準品大黃-8-O-β-D-葡萄糖
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品偽金絲桃
蕨類保色液酵母 2-苯并噻唑-6-甲乙酯轉(zhuǎn)化生長因子β1
緊密青霉 4-氨基-3,5-二苯轉(zhuǎn)化生長因子β2
枯草芽孢桿 (芐氧羰基)三苯基溴化轉(zhuǎn)化生長因子β3
葡萄座腔 4-氨基-1,2,5-噁二唑-3-甲轉(zhuǎn)錄因子
釀酒酵母 三-(4-叔丁基苯基)磷酯轉(zhuǎn)鐵蛋白
單色革蓋 D-3-(1-萘基)-轉(zhuǎn)鐵蛋白受體
鹽古桿 奈帕芬轉(zhuǎn)移因子
蒂莫內(nèi)馬賽 2-氨基-3-苯甲?;?alpha-(甲硫基)苯乙??偊碌矸蹣拥鞍?/span>
黑芝 2-甲基-2-基-1,3-烷二總膽固
枯草芽孢桿 三季戊四總膽紅
曲霉 3-溴-4-氟苯甲酰溴總膽汁
大豆慢生根瘤 雙芬二乙鹽總蛋白
木拉克德克斯酵母 5-異基吡唑-3-甲乙酯總抗氧化能力
大腸埃希氏噬體 n-甲氧基-n-甲基乙??傝F結(jié)合力
球孢白僵 R-N-Cbz-3-甲總脂肪
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