您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> JYBL-Ⅱ脫鈣液
貨號(hào) | FS-X9992 |
---|
產(chǎn)品介紹:
用途: 快速脫鈣液,比JYBL-Ⅰ脫鈣液更迅速,對(duì)組織亦有損失。 注意事項(xiàng): 主要由甲酸、福爾馬林等組成,一般24h完成脫鈣。 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
中文名稱(chēng):JYBL-Ⅱ脫鈣液
英文名稱(chēng):
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
貨號(hào):FS-X9992
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
凸臍儒孢菌CD20抗體Human HEV-IgM(hepatitis E virus-Immunoglobulin M) 人鋅指蛋白R(shí)IZ(PRDM2)免疫試劑盒
古布爾班克氏菌屬12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框40抗體Human SCRG1(Scrapie responsive protein 1) 人鋅指蛋白644(ZNF644)免疫試劑盒
鼠強(qiáng)對(duì)照液(乙乙酯介質(zhì))12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體Human alpha 1 microglobulin 人鋅α2糖蛋白(AZGP1)免疫試劑盒
瓜果腐霉11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體Human LAMTOR1(Ragulator complex protein LAMTOR1) 人心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)免疫試劑盒
粗糙艾美耳球蟲(chóng)11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) 人心肌營(yíng)養(yǎng)1(CT-1)免疫試劑盒
高盧蜜環(huán)菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
玫瑰變紅鏈霉菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框16抗體Human PHF6(PHD finger protein 6) 人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)免疫試劑盒
云微所奇異球菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體Human HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) 人心肌肌球蛋白重鏈(MHC)自身抗體免疫試劑盒
芽孢桿菌屬11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體Human Cytochrome b-245 Beta Polypeptide 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)免疫試劑盒
馬賽菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體Human NADPH oxidase 5 人心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒
林地蘑菇11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體Human TRXR3(Thioredoxin reductase 3) 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
黑曲霉11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) 人協(xié)同激分子受體(CMR)免疫試劑盒
優(yōu)美氈被孔菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框71抗體Human MFN2(Mitofusin-2) 人小而密低密度脂蛋白(sLDL)免疫試劑盒
根霉11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體Human NT-proCNP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) 人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)免疫試劑盒
大豆擬莖點(diǎn)霉12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) 人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)免疫試劑盒
乳桿菌屬12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體Human ASMA(Anti Smooth Muscle Antibody) 人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)免疫試劑盒
匍柄霉Stemphylium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREB病試劑盒根薯內(nèi)酯A
微小桿菌Microvirga│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREB病試劑盒骨化三
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRE3泛蛋白連接TRIM68試劑盒骨化二
JYBL-Ⅱ脫鈣液放射形根瘤 Fulvestrant乳脂肪球EGF因子蛋白8
細(xì)黃鏈霉 Autocamtide 2 trifluoroacetate salt過(guò)氧化物還原6
微小桿屬 Angiotensin III,human毛狀樣蛋白1
Pseudofusicoccum stromaticum 2-Methoxy-5-(N-phthalimidinyl)benzenesulfonyl chlo轉(zhuǎn)膠蛋白2
色擲孢酵母 Peptide YY Fragment 3-36 human甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽-1
釀酒酵母 LY2886721Ras GTP
瑟氏泰勒蟲(chóng)(兩當(dāng)株) LY2940680狂犬病IgG抗體
淡紫灰鏈霉產(chǎn)褐色變種 Ledipasvir泛特異性蛋白2
藤倉(cāng)鐮孢 LY2874455核糖核2
Flavihumibacter Tolterodine tartrate透明質(zhì)2
枯草芽孢桿 Etomoxir鋅指e-box-binding同源盒2
金針菇 LY2608204RECK蛋白
茶擬盤(pán)多毛孢 黑化誘導(dǎo)神經(jīng)肽磷化酪激
西唐氏鏈霉 LY2784544β2糖蛋白1IgG抗體
胡椒枯萎病 絲拉克肽β2糖蛋白1IgM抗體
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。