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貨號 | FS-X10145 |
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產品介紹:
用途: 煙曲霉菌等染色 注意事項: 染色后孢子與菌絲呈藍色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
中文名稱:乳酸酚棉藍染色液
英文名稱:
產品規(guī)格:50ml|100ml
貨號:FS-X10145
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
鴨疫里氏桿菌成纖維生長因子受體4抗體Human CDIPT (CDP-diacylglycerol–inositol 3-phosphatidyltransferase) 牛單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
嘴突凸臍蠕孢凝血原(纖維介)抗體Human KIN1 (Caskin-1) 牛催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
牛布氏菌陽性血清國家標準品(虎紅平板)衰老關鍵蛋白抗體Human CMYA5 (Cardiomyopathy-associated protein 5) 牛催產(OT)免疫試劑盒
Rhizobium 凋亡調節(jié)基因之一抗體Human CRTAC1 (Cartilage acidic protein 1) 牛促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒
塔氏糖多孢菌凋亡調節(jié)基因之一抗體(短型)Human NCAM2(Neural cell adhesion molecule 2) 牛促腎上腺皮質激(ACTH)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌纖維連接蛋白抗體Human CABS1 (Calcium-binding and spermatid-specific protein 1) 牛促卵泡(FSH)免疫試劑盒
大腸埃希菌FosB蛋白抗體Human MICU1(Calcium uptake protein 1, mitochondrial) 牛促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
金黃殼囊孢FRA2/FOSL2抗體Human CAPS2 (Calcyphosin-2) 牛雌(E1)免疫試劑盒
墳墓節(jié)桿菌叉頭蛋白P3抗體Human CCIN (Calicin) 牛雌三(E3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌成纖維生長因子8抗體Human CAMSAP1 (Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1) 牛雌激(E)免疫試劑盒
土曲霉肌動蛋白結合蛋白Fascin抗體Human AP1M1(AP-1 complex subunit mu-1) 牛雌二(E2)免疫試劑盒
燒土正青霉線粒體裂變1蛋白抗體Human COMTD1 (Catechol O-methyltransferase domain-containing protein 1) 牛成纖維生長因子23(FGF23)免疫試劑盒
雞縱菌叉頭蛋白P1抗體Human Q1 (Calsequestrin-1) 牛成纖維生長因子21(FGF21)免疫試劑盒
蘋果錐梗孢鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克抗體Human CTNND1 (Catenin delta-1) 牛長鏈脂酰CoA脫氫(ACADL)免疫試劑盒
噬尼古丁節(jié)桿菌纖維母生長因子5抗體Human CTCF (Transcriptional repressor CTCF) 牛草酰乙免疫試劑盒
微紫青霉脆性X綜合征相關蛋白AFF1抗體Human CTNNBIP1 (Beta-catenin-interacting protein 1) 牛布魯氏桿菌抗體(IgM)免疫試劑盒
壁芽孢桿菌Bacillus│muralis 質量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)L-天冬酰
巴貝斯蟲未定種(伊寧株)Babesia│sp. 質量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)L-天冬
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質量規(guī)格:Standard for GC ,>99%(GC)L-蘇
乳酸酚棉藍染色液香菇 4-羥基喹唑啉蛋白質二硫鍵異構
草青霉 4-溴丁甲酯類鈣調磷B蛋白
假單胞屬 5--1-甲基-4-硝基咪唑纖維合成
果生鏈核盤 果糖二磷鈉水合物可溶性果膠
三棱孢小囊 粘KORRIGAN
氏假單胞 2,4,6-三羥基苯甲端粒逆轉錄
解淀粉周培瑾氏 溴甲基喹啉酮; 4-溴甲基喹啉-2-酮還原型輔Ⅰ
皺曲毛殼 3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡抗維生C氧化
鼠乳桿 2-苯并咪唑絲棕櫚酰轉移
釀酒酵母 優(yōu)力膚(克羅他通)β-半乳甘露聚糖
釀酒酵母 表雄酮β-半乳糖甘露聚糖
福氏志賀氏 n-已基三苯基膦NAD激
蠟狀芽孢桿 環(huán)戊基異酯NAD激
細鏈格孢 辛基膦末端脫氧核轉移
美澳型核果褐腐病 草甘薯病2
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