當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 紅細(xì)胞稀釋液(計數(shù)液)
貨號 | FS-X9921 |
---|
產(chǎn)品介紹:
用途: 用于紅細(xì)胞計數(shù) 注意事項: 由檸檬酸鈉,等組成。 儲存條件:室溫,12個月 |
中文名稱:紅細(xì)胞稀釋液(計數(shù)液)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
貨號:FS-X9921
實(shí)驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
密蘇里游動放線菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體Human GTF2H3 小鼠催乳抑制激(PIH)免疫試劑盒
粉紅單端孢霉Bcl-2樣蛋白2抗體Human GSTM4 小鼠催乳釋放激(PRH)免疫試劑盒
釀酒酵母殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白抗體Human GTF2H5 小鼠催乳(PRL)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌Bcl-2抗體Human GYG2 小鼠催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒
根瘤菌腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體Human GTF3C5 小鼠促有絲分裂因子(MF/MPF)免疫試劑盒
腸沙門氏菌腸炎亞種膽鹽激活脂肪抗體Human GTPBP3 小鼠促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒
面粉增白劑速測卡3-羥丁脫氫抗體Human GTPBP1 小鼠促生長激釋放激(GHRH)免疫試劑盒
桔橙鏈霉菌長鏈脂肪?;饪贵wHuman GTPBP2 小鼠促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)免疫試劑盒
Pilidium concavum磷化癌易感基因1抗體Human GTPBP4 小鼠促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
藻渣梭菌磷化β分泌抗體Human GTSE1 小鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒
煙曲霉磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GUCY1A3 小鼠促甲狀腺釋放激(TRH)免疫試劑盒
黑色小單孢菌磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GTPBP5 小鼠促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
莖生擬莖點(diǎn)霉磷化Bcl-2抗體Human GUCY1B3 小鼠雌三(E3)免疫試劑盒
微小毛霉磷化癌易感基因1抗體Human GTF2H3 小鼠雌激硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)免疫試劑盒
Rhizobium multihospitium磷化癌易感基因1抗體Human GTF2H2C 小鼠雌激(E)免疫試劑盒
Pseudomonas eucalypticola磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體Human GTF2H5 小鼠雌二受體(ER)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRβ試劑盒三十烷
同溫層芽孢桿菌Bacillus│stratosphericus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRβ位淀粉樣前體蛋白裂解2試劑盒Ⅳ
淺白隱球酵母Cryptococcus│albidus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRβ位淀粉樣前體蛋白裂解1試劑盒Ⅲ
紅細(xì)胞稀釋液(計數(shù)液)宋內(nèi)氏志賀氏51592 1-(2-甲氧基苯基)哌氫鹽RAR相關(guān)孤兒受體γ
謝瓦曲霉 2'-溴-4'-氟乙酰苯二肽基肽Ⅳ
*蜜環(huán) 對羥基苯丁酮抗磷脂IgG抗體
紫穗槐根瘤 2-羥基環(huán)戊烷羧甲酯抗磷脂IgM抗體
白地霉 3-甲氧苯白抗原F
魯氏不動桿 (R)-(+)-2-芐氧基流行性腦膜炎球抗體
繩狀籃狀 2,3,5-三3羧基4甲基5基2呋喃基
青霉 3-甲基芐人類嗜TⅠ型病IgG抗體
乳乳球乳脂亞種 4,5-二-2-甲基噠-3-酮干擾誘導(dǎo)蛋白44
球孢鏈霉高加索變種 地雷他定海藻糖
產(chǎn)氨短桿 N-甲基環(huán)己酪蛋白激受體ErbB3
運(yùn)動發(fā)酵單胞 5-氮雜-3-甲CD33分子
杜搟氏 1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽鹽外異蛋白A
豌豆根瘤 1-溴-4,5-二-2-(易)核因子紅2相關(guān)因子2
淡紫灰鏈霉 鈉一水合物類固17α羥化
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。