當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TANP人心鈉肽ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ANP人心鈉肽ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit |
貨號 | FS-H63300 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準
Malassezia furfur 糠秕馬拉色菌(糠秕孢子菌)Malassezia furfur凍干安全等級:1模式菌株:no生物醫(yī)學(xué)研究糠秕孢子菌培養(yǎng)基:麥芽汁瓊脂 60.0 g,牛膽汁(干燥) 20.0 g,吐溫40 10.0 g,Glycerol mono-olea(單椰子油甘油酯) 2.5 g,蒸餾 1.0 L。121℃,15min。生長條件:28-30℃,好氧,24h 純度:≥99.0% (GC)
Candida boidinii 博伊丁假絲酵母Candida boidinii凍干物安全等級:1模式菌株:no處理垃圾除臭YM 培養(yǎng)基:酵母提取物,3.0 g 麥芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白棟,5.0 g 瓊脂,20.0 g 蒸餾1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2生長條件:25℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥99.0% (GC)
Pichia│burtonii 伯頓畢赤酵母Pichia│burtonii凍干物安全等級:1模式菌株:no越南飼料酵母(可利用淀, 生米糠);雞糞除臭。能直接13生長條件:25-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pyxidicoccusfallax PyxidicoccusfallaxPyxidicoccusfallax安全等級:1模式菌株:no 純度:98%
Vibrio vulnficus 創(chuàng)傷弧菌Vibrio vulnficus凍干物安全等級:2研究、質(zhì)量控制3.5%瓊脂培養(yǎng)基:牛肉浸液(1:3)1.0L,蛋白胨 10.0g,NaCl 35.0g,瓊脂 20.0g,pH7.2~7.4。生長條件:30℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Lactobacillus johnsonii 約氏乳桿菌Lactobacillus johnsonii安全等級:1模式菌株:no飼料添加劑MRS培養(yǎng)基:酷蛋白胨 10.0克 牛肉浸取物 10.0克 酵母提取液 5.0克 葡萄糖 5.0克 鈉 5.0克 檸檬二胺 2.0克 吐溫80 1.0克 磷氫二鉀 2.0克 七鎂 0.2克 七錳 0.05克 碳鈣 20.0克 瓊脂 20.0克 蒸餾 1.0升 pH6.8生長條件:30℃ 純度:98%
Oleispiraantarctica OleispiraantarcticaOleispiraantarctica分離基物:海,南羅斯海灣安全等級:1模式菌株:102+1%吐溫40生長條件:30℃ 純度:98%
Sphingomonaspituitosa SphingomonaspituitosaSphingomonaspituitosa分離基物:,春季,人為的富安全等級:1模式菌株:2生長條件:30℃ 純度:≥85% (GC)
ANP人心鈉肽ELISA試劑盒實驗原理Reinforced Clostridial Medium人角膜上皮總RNA6-溴-2-萘酚FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor) 促卵泡激素受體抗原
哥倫比亞瓊脂人角膜總RNA十二羰基三釕FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡激素抗原
Columbia Agar人視網(wǎng)膜色素上皮總RNA十二羰基三釕GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基丁A型受體α1抗原
沙氏葡萄糖肉湯人晶狀體上皮總RNA十二羰基三釕GABAB1(GABAb Receptor 1) g-氨基丁B1受體(多肽)
Sabouraud Dextrose Broth人虹膜色素上皮總RNA鐵(III) 水合物GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基丁A型受體B2抗原
沙氏葡萄糖瓊脂人結(jié)膜成纖維總RNA鉻,水合GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷氨脫羧酶-67抗原
Sabouraud Dextrose Agar人無色素睫狀上皮總RNA伊馬替尼GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153) 生長抑制DNA損傷基因153抗原
胰蛋白大豆肉湯人梁網(wǎng)總RNA伊馬替尼phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗原
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