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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TODF人破骨細(xì)胞分化因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ODF人破骨細(xì)胞分化因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human osteoclast differentiation factor, ODF Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63714 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Alcanivorax│nanshagensis 南沙食烷菌Alcanivorax│nanshagensis分離基物:沉積物/深海沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Alromonas│marina 海洋交替單胞菌Alromonas│marina分離基物:樣/上層海凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油污染海域菌群471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salinisphaera│shabanensis 沙班鹽球形菌Salinisphaera│shabanensis分離基物:沉積物/土黃色沉積物5-10cm凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no1、海洋石油污染生物修復(fù); 2、生物活性物質(zhì)篩選。821生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98+%
Hyphomonas│pacificus 太平洋生絲單胞菌Hyphomonas│pacificus分離基物:沉積物/熱液區(qū)沉積物凍干物模式菌株:no1、海洋石油污染生物修復(fù); 2、生物活性物質(zhì)篩選。821生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98+%
Jannaschia│rubra 紅色簡(jiǎn)納西氏菌Jannaschia│rubra分離基物:樣/表層海凍干物模式菌株:,用于分類學(xué)研究。471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98+%
Thioclava│sp. 硫膨大桿菌Thioclava│sp.分離基物:沉積物/近海沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群1001生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Phenylobacrium│falsum 假基桿菌Phenylobacrium│falsum分離基物:沉積物/深海沉積物上覆凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。472生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Vibrio│fischeri 費(fèi)氏弧菌Vibrio│fischeri凍干物安全等級(jí):1模式菌株:;環(huán)境污染物監(jiān)測(cè)菌:發(fā)光菌471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
ODF人破骨細(xì)胞分化因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理PAI-2 纖溶酶原激活物抑制因子2抗體松脂二葡萄糖苷3-(基)苯甲酰Human NFYC (Nuclear Tranion Factor Y Gamma) ELISA Kit
phosphor-PAK1+PAK2+PAK3 (Ser141) 磷化p21激活激酶1/2/3抗體2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷2-溴-6-苯甲Human MUC5AC (Mucin 5 Subtype AC) ELISA Kit
Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷化p21激活激酶1/2抗體貝母素甲2-溴-6-苯甲Human MUC5B (Mucin 5 Subtype B) ELISA Kit
Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) 磷化p21激活激酶1/2抗體貝母素乙1-溴-3-(氧基)苯Human MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit
phospho-PAK1(Ser144) 磷化p21激活激酶1抗體連翹苷1-溴-3-(氧基)苯Human MEC/CCL28 (Mucosae Associated Epithelia Chemokine) ELISA Kit
phospho-PAK2(Ser141) 磷化p21激活激酶2抗體三七皂苷R11-溴-3-(氧基)苯Human eIF3a (Eukaryotic Translation Initiation Factor 3a) ELISA Kit
Phospho-PAK2 (Ser20) 磷化p21激活激酶2抗體棗仁皂苷A(S)-(+)-3-甲基-2-丁胺Human PC4 (Positive Cofactor 4) ELISA Kit
phospho-PAK3(Ser139) 磷化p21激活激酶3抗體棗仁皂苷B(S)-3,3-二甲基-2-丁胺Human LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit
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