產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：大鼠乳腺癌細(xì)胞    

產(chǎn)品英文：MADB106

貨號：FS-01X9718

細(xì)胞培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S  

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫   

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實(shí)驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Human Hepatitis D virus IgM，HDV IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒英文名稱：human hepatitis E virus IgG，HEV-IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Human Hepatitis D virus IgM，HDV IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA試劑盒英文名稱：human Hepatitis D virus IgG，HDV IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Human Hepatitis C virus IgM，HCV-IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Human Hepatitis C virus IgG，HCV-IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒英文名稱：Human glucoprotein 130，gp130 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人促腎上腺皮質(zhì)釋放因子(CRF)ELISA試劑盒 英文名稱：Human corticotropin-releasing factor，CRF 規(guī)格:96T/48T

人睪受體(TR)ELISA試劑盒英文名稱：Human Testoterone recepter，TR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒英文名稱：human glycoprotein 49A，Gp49a ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人抑制β-B(Inhbb)ELISA試劑盒英文名稱：human inhibin beta-B，Inhbb ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人生長釋放ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 英文名稱：Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin，GHRP-Ghrelin ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人鈣調(diào)(CAM)ELISA試劑盒 英文名稱：Human calmodulin，CAM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人降鈣原(PCT)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Procalcitonin，PCT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人生長結(jié)合蛋白(GHBP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Growth Hormone Binding Protein，GHBP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人腎上腺髓質(zhì)(ADM)ELISA試劑盒 英文名稱：Human adrenomedullin，ADM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人免疫反應(yīng)性生長(irGH)ELISA試劑盒英文名稱：Human Immunoreactive growth hormone，irGH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人雌受體(ER)ELISA試劑盒英文名稱：Human Estrogen Receptor，ER ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠乳腺癌細(xì)胞Brk/PTK6  酪蛋白激6(乳腺腫瘤激)規(guī)格: 0.2ml

CrkRS/CRK7  細(xì)胞分裂周期2相關(guān)蛋白激7抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513)  磷化神經(jīng)上皮酪抗體（乳腺癌激10）規(guī)格: 0.1ml

Ret/HSCR1  原癌基因酪蛋白激受體RET/多發(fā)性內(nèi)分泌腺瘤和甲狀腺髓樣癌蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-Ret/HSCR1(Tyr1062)  磷化原癌基因酪蛋白激受體RET抗體規(guī)格: 0.1ml

LDHD  乳脫氫D抗體規(guī)格: 0.2ml

ENO1+ENO2+ENO3  神經(jīng)元，肌肉特異性烯化抗體規(guī)格: 0.2ml

AKR1B10  醛糖還原相關(guān)蛋白質(zhì)抗體規(guī)格: 0.2ml