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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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JYBL-Ⅳ脫鈣液

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 15:00:25瀏覽次數(shù):176次

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貨號(hào) FS-X9994
JYBL-Ⅳ脫鈣液正在熱銷的產(chǎn)品:RGS2 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體AR,99.5%
RGS5 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體CP,99.5%
RhoA RhoA抗體GR,99.8%
Rho C RhoC抗體PT,99.8%
RIP2 受體結(jié)合絲氨蘇氨激2抗體光譜級(jí)
Phospho-RIP2 (Ser176) 化受體結(jié)合絲氨蘇氨激2抗體用于和昆蟲培養(yǎng),≥99.5% (T)
RIP3

產(chǎn)品介紹:

用途:

緩慢組織脫鈣液

注意事項(xiàng):

主要由50%甲酸、福爾馬林等組成。

儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月

中文名稱:JYBL-Ⅳ脫鈣液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:500ml

貨號(hào):FS-X9994

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

銹赤蠟黃鏈霉菌12號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Human MFN2(Mitofusin-2) 降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒

慢生根瘤菌磷化鈣調(diào)節(jié)抗體Human ILDR2(Immunoglobulin-like domain-containing receptor 2) 維蛋白原α鏈(FGA)免疫試劑盒

釀酒酵母分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human NPY(Neuropeptide Y) 人白原(Fb)免疫試劑盒

泡盛曲霉磷化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) 人纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒

馬沙門氏菌磷化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human TP53 antibody(p53 antibody) 人纖溶原(Plg)免疫試劑盒

白黃馬賽菌CD3抗體Human Galactose-Deficient IgA1(Galactose-Deficient IgA1) 人纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒

黃曲霉CD4抗體Human ENK(Enkephalin) 人纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)免疫試劑盒

芽孢桿菌白共同抗原抗體Human β-actin(Beta actin) 人纖連蛋白(FN)自身抗體免疫試劑盒

布魯塞爾德克酵母白共同抗原抗體Human AA(Arachidonic Acid) 人纖連蛋白(FN)免疫試劑盒

食有機(jī)物深海芽孢桿菌白共同抗原抗體Human MBP(myelin basic protein) 人纖調(diào)蛋白(FMOD)免疫試劑盒

卡門柏青霉間隙連接蛋白36抗體Human ACP(Acid phosphatase) 人細(xì)小病B19(B19V)抗體(IgM)免疫試劑盒

Methylibium12號(hào)染色體開放閱讀框61抗體Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) 人周期A2(Cyclin-A2)免疫試劑盒

釀酒酵母12號(hào)染色體開放閱讀框63抗體Human CHAT(Choline O-acetyltransferase) 人周期蛋白依賴性激2(CDK2)免疫試劑盒

毛栓孔菌12號(hào)染色體開放閱讀框68抗體Human HbsAg(hepatitis B virus Surface Antigen) 人周期蛋白A1(CCNA1)免疫試劑盒

類芽孢桿菌屬角蛋白15抗體Human IMPDH2(Inosine 5′-Monophosphate Dehydrogenase 2) 人因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒

氧化節(jié)桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框103抗體Human TPAb(Treponema pallidum antibody) 人因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒

木防已盤多毛孢Pestalotia│cocculi 質(zhì)量規(guī)格:BSD二聚體試劑盒光翠雀堿

菌核青霉Penicillium│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDNA拓?fù)洚悩?gòu)1試劑盒枸櫞

稀褶黑菇Russula│nigricans (Bull.) Fr. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白試劑盒狗牙花堿D乙
JYBL-Ⅳ脫鈣液粗皮馬勃 Baricitinib亞甲基四氫脫氫1

釀酒酵母 Lafutidine促吞噬肽

紫紅曲霉 內(nèi)皮-1DNA聚合δ1

蘇云金芽胞桿 AZD6482Na+?;悄懝厕D(zhuǎn)運(yùn)多肽

金龜子假絲酵母 CZC24832尼克酰腺二核磷氧化5

水冷源橙色單胞 Cabozantinib malate (XL184)低氧誘導(dǎo)因子-1β

阿木氏鏈霉 Cidofovir白介38抗體

香菇 CalcipotriolCD27分子

釀酒酵母 RaltitrexedDeltaFosB

全食副球 Mosapride Citrate異戊烯基腺核

類產(chǎn)堿假單胞 CI994 (Tacedinaline)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ

啤酒酵母 KY02111球蛋白k可變1D-13

蕈青霉 Dacomitinib (PF299804, PF299)CD109分子

草菇 Proinsulin C-Peptide (55-89) human肝-血小板因子4復(fù)合物IgG抗體

Pelagibacterium BIX 02188α羥丁

 


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