姬姆薩染色液(Giemsa stain,即用型)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X10094

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

中文名稱：姬姆薩染色液(Giemsa stain,即用型)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100ml|500ml

貨號(hào)：FS-X10094

產(chǎn)品介紹:

用途：

血液和細(xì)胞涂片、細(xì)菌、染色體顯帶、原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)等染色

注意事項(xiàng)：

細(xì)胞核呈紫紅色或藍(lán)紫色，胞漿呈粉紅色，無(wú)需磷酸鹽緩沖液，直接使用。

儲(chǔ)存條件：室溫，24個(gè)月

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

黑曲霉磷化DDX58抗體Human SPOPL (Speckle-type POZ protein-like) 人白介2(IL-2)免疫試劑盒

球孢白僵菌磷化DDX58抗體Human SPTA1 (Spectrin alpha chain, erythrocytic 1) 人白介1受體樣1(IL1RL1)免疫試劑盒

釀酒酵母磷化結(jié)蛋白抗體Human SMTN (Smoothelin) 人白介1受體相關(guān)激-4(IRAK-4)免疫試劑盒

微桿菌屬磷化結(jié)蛋白抗體Human SP1(Transcription factor Sp1) 人白介1受體相關(guān)激1(IRAK1)免疫試劑盒

產(chǎn)堿假單胞菌二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human SLC23A1 (Solute carrier family 23 member 1) 人白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒

宋內(nèi)氏志賀氏菌51592多巴受體D2抗體Human SRM (Spermidine synthase) 人白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)免疫試劑盒

謝瓦曲霉多巴受體D1抗體Human GPLD1(Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D) 人白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)免疫試劑盒

*蜜環(huán)菌多巴受體相互作用蛋白1抗體Human SMS (Spermine synthase) 人白介1β轉(zhuǎn)換(ICE)免疫試劑盒

紫穗槐根瘤菌凋亡相關(guān)蛋白激1抗體Human SLC18A3 (Vesicular acetylcholine transporter) 人白介-1β前體(Pro-IL-1β)免疫試劑盒

白地霉凋亡相關(guān)蛋白激2抗體Human SON (Protein SON) 人白介1β前體(pro-IL1B)免疫試劑盒

魯氏不動(dòng)桿菌多巴、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體Human SMPD2 (Sphingomyelin phosphodiesterase 2) 人白介1β(IL-1β)免疫試劑盒

繩狀籃狀菌磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) 人白介1α(IL-1α)免疫試劑盒

青霉菌磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) 人白介19(IL-19)免疫試劑盒

乳乳球菌乳脂亞種磷化雙皮質(zhì)抗體Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) 人白介18結(jié)合蛋白(IL-18BP)免疫試劑盒

球孢鏈霉菌高加索變種磷化Disabled 1抗體Human SORT1(Sortilin) 人白介18(IL-18)免疫試劑盒

產(chǎn)短桿菌磷化Disabled 1抗體Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) 人白介17F(IL-17F)免疫試劑盒

微球菌Micrococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml七葉皂C

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml七葉皂B

: ivcas7.00615資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml七葉皂A
姬姆薩染色液(Giemsa stain,即用型)木犀青霉 3-苯乙炔硫氧化還原蛋白

葡萄球?qū)?/span> 3-乙炔線粒體呼吸鏈復(fù)合物I

丁香假單胞二基硅烷線粒體呼吸鏈復(fù)合物II

馬來(lái)西亞鏈霉 3,6-壬二烯(異構(gòu)體的混合物)線粒體呼吸鏈復(fù)合物III

鮑氏桑黃 2-乙炔苯線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV

黃曲霉 5-溴-2-氟吡啶總抗氧化能力

大豆慢生根瘤 2,5-二溴三氟甲苯超氧陰離子

漢遜德巴利酵母 3-羥基異喹啉總蛋白

糙孢曲霉芐基二苯基膦總蛋白

鏈格孢三環(huán)戊基膦核孤兒受體4A1

貝形側(cè)耳、鷹翅化鈀9-順式環(huán)氧類胡蘿卜雙加氧

考克氏對(duì)甲酯9-順式環(huán)氧類胡蘿卜雙加氧

構(gòu)巢曲霉硫鈰水合物內(nèi)源

產(chǎn)氨棒桿 L（-）-阿洛糖β-胡蘿卜羥化

核盤 Fmoc-N'-三氟乙?；?L-賴擴(kuò)展蛋白
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)