當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TEloA人延伸蛋白AELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | EloA人延伸蛋白AELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human elongin A, EloA Elisa Kit |
貨號 | FS-H64386 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
TAF10 Polyclonal Antibody TAF10抗體
TACE Antibody,TACE,CD156b,Disintegrin and metalloproteinase domaincontaining protein 17; ADAM 17; TNFalphaconverting enzyme; TNFalpha convertase; Snake venomlike protease TACE抗體
TACE Antibody (TNFalpha converting enzyme, ADAM17) TACE抗體
TAB3 Antibody (NT) (MAP3K7interacting protein 3, MAP3K7IP3, NAP1) TAB3抗體(N末端)
TAB2 Antibody (CT) (MAP3K7interacting protein 2, MAP3K7IP2, CHTD2) TAB2抗體(C末端)
TAB1 Antibody,ANTI TAB1 ,TAK1,TGF beta activated kinase 1 ,MGC57664,MAP3K7IP1 TAB1抗體
AntiT7 Tag Mouse Monoclonal Antibody (6D4), HRP Conjugated T7標(biāo)簽單克隆抗體(6D4), HRP偶聯(lián)
T7 Epitope Tag Antibody T7 Epitope Tag抗體
ARRS Polyclonal Antibody S抗原抗體
AntiS Tag Mouse Monoclonal Antibody (9T10), HRP Conjugated S標(biāo)簽單克隆抗體(9T10), HRP偶聯(lián)
LRRC62 富含亮重復(fù)蛋白62抗體 * 0.2ml Cellulase
MFAP1 微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體 * 0.2ml Chondroitin sulfate
MNS1 減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 * 0.2ml Isonicotinic acid
MPP9/MPHOSPH9 有絲分裂周期蛋白MPP9抗體 * 0.2ml LMalic acid
NEDD1 神經(jīng)前體表達(dá)蛋白1抗體 * 0.2ml Proteinase K Solution, 20 mg/ml
NEK1 絲/蘇蛋白激酶NEK1抗體 * 0.2ml PolyLlysine solution ( 0.1%)
NEK8 絲/蘇蛋白激酶NEK8抗體 * 0.2ml Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterile
NSP5 核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體 * 0.2ml DGlucose6phosphate, disodium, dihydrate
人參皂苷Ro Ginsenoside Ro 規(guī)格:20mg
穗花杉雙黃 Amentoflavone 規(guī)格:20mg
芫花素(暫行) Genkwanin (Provisional) 規(guī)格:20mg
對羥基乙 Hydroxy Acetophenone 規(guī)格:20mg
細(xì)辛脂素 Asarinin 規(guī)格:約20mg
紫萁 Osmunda ketone 規(guī)格:20mg
太子參環(huán)肽B Radix Pseudoslariae cyclic peptide B 規(guī)格:20mg
旱蓮苷A Total flavone glycoside A 規(guī)格:20mg
(±)原蘇木素B (+) protosappanin B 規(guī)格:20mg
巴西蘇木素(暫行) Brazil hematoxylin (Provisional) 規(guī)格:20mg
α-常春藤皂苷 - hederin 規(guī)格:20mg
洋艾素 Absinthin 規(guī)格:20mg
EloA人延伸蛋白AELISA試劑盒實驗原理DLST蛋白抗體Porcine PL (Placental Lactogen) ELISA Kit
橋粒斑蛋白1+2抗體Porcine HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit
橋粒芯糖蛋白2抗體Porcine ANGPTL3 (Angiopoietin Like Protein 3) ELISA Kit
發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL抗體Porcine TALLA-1 (T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia Antigen) ELISA Kit
DNA聚合酶γ抗體Porcine PGAM2 (Phosphoglycerate Mutase 2) ELISA Kit
死亡受體5抗體Porcine SM/SPH (Sphingomyelin) ELISA Kit
橋粒芯糖蛋白4抗體Porcine AR (Androgen Receptor) ELISA Kit
自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體Porcine SMM (Smooth Muscle Myosin) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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