產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：睪丸間質(zhì)細胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9851

產(chǎn)品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠17-類固(17-KS)ELISA試劑盒英文名稱：Rat 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒英文名稱：Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒英文名稱：Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRβ ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠白介3(IL-3)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠白介5(IL-5)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 5,IL-5 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠苗條受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠瘦(LEP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leptin,LEP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒英文名稱：Rat leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒英文名稱：Rat L-Selectin ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒英文名稱：Rat monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒英文名稱：Rat monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒英文名稱：Rat monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒英文名稱：Rat macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒英文名稱：Rat macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)ELISA試劑盒英文名稱：Rat matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
睪丸間質(zhì)細胞HIST1H2AH  組蛋白H2A/S抗體規(guī)格: 0.2ml

KIF20A/MKLP2  有絲分裂驅動蛋白樣2抗體規(guī)格: 0.2ml

TRIM25  雌反應鋅指蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-TRIM25(The91)  磷化雌反應指狀蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

TIP47/M6PRBP1  脂滴相關蛋白TIP47抗體規(guī)格: 0.2ml

TLS/FUS  粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體規(guī)格: 0.2ml

KIF2B  有絲分裂驅動蛋白樣2B抗體規(guī)格: 0.2ml

KLHL13  kelch樣蛋白13抗體規(guī)格: 0.2ml