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Rakoff染色液

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:46:05瀏覽次數(shù):162次

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貨號 FS-X9916
Rakoff染色液正在熱銷的產(chǎn)品:MIDN 中腦核仁蛋白抗體硒粉 99.9% metals basis,200目
Midkine 中期因子/肝結(jié)合生長因子抗體二氧化硒 AR,99%
MLCK 肌球蛋白輕鏈激抗體碲 99.99% metals basis
MLK3 絲氨/蘇氨蛋白激MLK3抗體4-二氨吡啶 99%
Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281) 化絲氨/蘇氨蛋白激

產(chǎn)品介紹:

用途:

陰道細(xì)胞學(xué)涂片快速測定雌激素水平

注意事項:

能較好區(qū)分鱗狀上皮細(xì)胞的嗜酸性細(xì)胞質(zhì)和嗜堿性細(xì)胞質(zhì)。

儲存條件:室溫,避光,12個月

中文名稱:Rakoff染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:100ml|500ml

貨號:FS-X9916

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

短裙竹蓀3-3ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Human HSD17B2 小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒

紡錘形擬酵母精加壓受體2抗體Human HSD17B4 小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒

蒂莫內(nèi)馬賽菌凋亡相關(guān)斑點樣蛋白ASC抗體Human HSD17B6 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒

蘋果鏈格孢絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIST2H2AA4 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒

長雙歧桿菌抗凝血3抗體Human HMCN1 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒

發(fā)酵假絲酵母人血清白蛋白單克抗體Human Histone-H3 小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫試劑盒

牡丹葡萄孢載脂蛋白A4抗體Human HIST3H2A 小鼠骨保護(OPG)免疫試劑盒

黃色桿菌磷化Rho鳥交換因子2抗體Human HIGD1A 小鼠過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒

百脈根中間根瘤菌磷化絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIGD1B 小鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒

天藍色鏈霉菌肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體Human HIVEP1 小鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒

支氣管敗血波氏菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體Human Hikeshi 小鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒

糞產(chǎn)堿菌糞亞種共濟失調(diào)7樣蛋白3B抗體Human HERC4 小鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒

平菇(科大雜優(yōu))感染性蛋白蛋白1抗體Human HEPACAM 小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒

釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體Human HIGD1B 小鼠睪(T)免疫試劑盒

污泥根瘤菌植物生長激ABP1抗體Human HEPACAM 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒

鴨疫里氏桿菌磷化活化復(fù)制因子2抗體Human Hikeshi 小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒

黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCκB抑制蛋白激試劑盒山椒子烯

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCγ谷酰轉(zhuǎn)移試劑盒1,3,5,8-四羥基山

肉灰色鏈霉菌Streptomyces│griseocarneus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCγ-谷酰環(huán)化轉(zhuǎn)移試劑盒四氫姜黃
Rakoff染色液念珠狀諾卡氏 鹽羅沙替丁醋酯(93793-83-0)類風(fēng)濕因子IgA抗體

黃暗色鏈霉 1-甲基-4-類風(fēng)濕因子IgG抗體

解淀粉芽孢桿 D-(-)-扁桃乙酯布魯東氏酪激

球孢白僵 2--4-溴-5-氟甲苯肺炎衣原體IgG抗體

土曲霉金色變種 二硫化二異基黃原酯肺炎衣原體IgM抗體

黑根霉 肼抗髓鞘少突膠質(zhì)糖蛋白抗體

燦爛類芽孢桿 3-溴-4-甲甲酯抗新蝶呤抗體

紡錘形賴芽孢桿 巴豆酰細(xì)粒棘球絳蟲糞IgG抗體

變異鏈霉 6-溴-2-氟吡啶細(xì)粒棘球絳蟲糞IGM抗體

腸沙門氏腸亞種 3-噻吩維生D結(jié)合蛋白1

大腸埃希氏桿 十二烷基溴化吡啶誘導(dǎo)骨髓白血病分化蛋白Mcl-1

醬油曲霉 4′-乙基苯乙酮肌骨

枯草芽孢桿 L-亮氨酰鹽鹽3-甲氧基去甲腎上腺

玉蜀黍赤霉 2,6-二氨基-4,5,6,7-四氫苯并噻唑3-甲氧基腎上腺

毛柄(金針菇) 4-苯酰甲基血小板內(nèi)皮聚集受體 1

 


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