當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TIAP人免疫抑制酸性蛋白ELISA試劑盒實驗原理
?
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | IAP人免疫抑制酸性蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human immunosuppressive acidic protein, IAP Elisa Kit |
貨號 | FS-H64392 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形株
CM-R084大鼠骨骼肌*培養(yǎng)基100mL
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 人裂解液 (陽性對照)
MiaCaPa-2人胰腺癌 Human pancreatic cancer cell line MiaCaPa-2 DMEM+10% FBS
IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
鼠破骨*培養(yǎng)基 100mL
CD137/TNFRSF9 CD137抗體規(guī)格: 0.2ml
CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗體規(guī)格: 0.2ml
CD146/MCAM 黑色素瘤粘附分子CD146抗體規(guī)格: 0.2ml
CD141/THBD 凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
CD13/ANPEN CD13氨肽酶N抗體規(guī)格: 0.1ml
LTheanine分子式:C7H14N2O3分子量:174.2
LTheanine分子式:C7H14N2O3分子量:174.2
LThreonine分子式:C4H9NO3分子量:119.12
LThreonine分子式:C4H9NO3分子量:119.12
LThreonine分子式:C4H9NO3分子量:119.12
LThreonine分子式:C4H9NO3分子量:119.12
LThreonine分子式:C4H9NO3分子量:119.12
LThreonine分子式:C4H9NO3分子量:119.12
LTryptophan分子式:C11H12N2O2分子量:204.23
LTryptophan分子式:C11H12N2O2分子量:204.23
LTryptophan分子式:C11H12N2O2分子量:204.23
LTryptophan分子式:C11H12N2O2分子量:204.23
LTryptophan分子式:C11H12N2O2分子量:204.23
LTryptophan分子式:C11H12N2O2分子量:204.23
LTryptophan分子式:C11H12N2O2分子量:204.23
LTyrosine分子式:C9H11NO3分子量:181.19
LTyrosine分子式:C9H11NO3分子量:181.19
LTyrosine分子式:C9H11NO3分子量:181.19
LTyrosine分子式:C9H11NO3分子量:181.19
LTyrosine分子式:C9H11NO3分子量:181.19
加蘭他敏 Galanthamine 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
(+)兒茶素;兒茶素 (+) catechin; catechin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
表兒茶素 Epicatechin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
表沒食子兒茶素 Epigallocatechin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
表沒食子兒茶素沒食子酯 Epigallocatechin gallate 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
表兒茶素沒食子酯 Epicatechin gallate 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
沒食子 Gallic acid 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
沒食子乙酯 Gallic acid ethyl ester 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
茶黃素-3-沒食子酯 Theaflavins -3- gallate 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
百秋李醇 ,廣藿香醇 Hundreds of autumn Li Chun, patchouli alcohol 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
薯蕷皂苷元 Diosgenin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
白樺脂 Betulinic acid 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
IAP人免疫抑制酸性蛋白ELISA試劑盒實驗原理DEK癌基因結(jié)合蛋白Porcine ADM (Adrenomedullin) ELISA Kit
PSD95結(jié)合蛋白1抗體Porcine CCSA-3 (Colon Cancer Specific Antigen-3) ELISA Kit
PSD95結(jié)合蛋白2抗體Porcine DPYSL3 (Dihydropyrimidinase Like Protein 3) ELISA Kit
PSD95結(jié)合蛋白4抗體Porcine PKCγ (Protein Kinase C Gamma) ELISA Kit
雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體Porcine IGFALS (Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit) ELISA Kit
雙特異性磷酶22抗體Porcine MT1M (Metallothionein 1M) ELISA Kit
Erdj5/DNAJC10蛋白抗體Porcine BLVRB (Biliverdin Reductase B) ELISA Kit
腫瘤調(diào)亡素/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體Porcine Anti-AChR (Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。