LPL脂蛋白酯酶檢測(cè)試劑盒可見分光光度法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-01S63544

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

規(guī)格：50管/24樣

檢測(cè)方法：可見分光光度法

貨號(hào)：FS-01S63544
商品介紹：

測(cè)定意義

脂蛋白酯酶是脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、乳腺細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成的一種酶，可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯，以供組織氧化供能和貯存，并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。

測(cè)定原理

脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基苯，在400nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

雞中心體蛋白110(CEP110)聯(lián)免疫試劑盒中度嗜熱雙突柄Human PON1 (Paraoxonase 1) ELISA Kit

雞生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)聯(lián)免疫試劑盒葡萄孢霉屬Human HNP1-3 (Neutrophil Peptide 1-3) ELISA Kit

雞神經(jīng)鈣黏蛋白(NCAD)聯(lián)免疫試劑盒管毛殼Human NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit

雞δ樣蛋白1同源物(DLK-1)聯(lián)免疫試劑盒非洲黑蛋巢Human NAP (Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit

雞干因子(SCF)聯(lián)免疫試劑盒紫荊生葉點(diǎn)霉Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit

雞凝血受體(TR)聯(lián)免疫試劑盒香菇Human ADAM22 (A Disintegrin And Metalloprotease 22) ELISA Kit

雞鈣腔蛋白(CALU)聯(lián)免疫試劑盒子午線假單胞Human TP63 (Tumor Protein p63) ELISA Kit

雞二肽基肽IV (DPP4)聯(lián)免疫試劑盒口腔支原體Human TACE (TNF α Converting Enzyme) ELISA Kit

雞超氧化物歧化1(SOD1)聯(lián)免疫試劑盒長(zhǎng)野解支鏈淀粉芽孢桿Human TNF-β (Tumor Necrosis Factor Beta) ELISA Kit

雞α1-B-糖蛋白(α1BG)聯(lián)免疫試劑盒扶桑本森頓酵母Human TL1A (Tumor Necrosis Factor Related Ligand 1A) ELISA Kit

雞尿嘧核苷磷化2(UPP2)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Human CCT8 (T-complex protein 1 subunit theta) ELISA kit

雞胎球蛋白A(FETUA)聯(lián)免疫試劑盒鏈霉Human CCT8L1 (T-complex 1 protein subunit theta-like 1) ELISA kit

雞磷脂A1(PLA1)聯(lián)免疫試劑盒溫特曲霉原變種Human CCT5 (T-complex 1 protein subunit epsilon) ELISA kit

雞抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)聯(lián)免疫試劑盒鍺栓孔Human CCT6A (T-complex 1 protein subunit zeta) ELISA kit

雞核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)聯(lián)免疫試劑盒香菇Human TWEAK (Tumour Necrosis Factor Related Weak Inducer of Apoptosis) ELISA Kit
LPL脂蛋白酯酶檢測(cè)試劑盒可見分光光度法轉(zhuǎn)錄因子ETV7抗體Human FGGY (FGGY carbohydrate kinase domain-containing protein) ELISA KIT2′-脫氧胞苷-5′-二磷三鈉鹽

ELAVL1抗體Human FBLL1 (rRNA/tRNA 2′-O-methyltransferase fibrillarin-like protein 1) ELISA KIT丁二銨

胚胎干相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human FIZ1 (Flt3-interacting zinc finger protein 1) ELISA KIT正庚乙酯

表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗體Human FAP (Prolyl endopeptidase FAP) ELISA KIT四乙基化銨

紅膜蛋白條帶EPB41L5抗體Human FLYWCH2 (FLYWCH family member 2) ELISA KIT人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）ELISA試劑盒,BDNF ELISA kit

早期發(fā)育調(diào)控蛋白1抗體Human FLYWCH1 (FLYWCH-type zinc finger-containing protein 1) ELISA KIT人敏感性脂肪（HSL）ELISA試劑盒, HSL ELISA

轉(zhuǎn)錄因子ETV6抗體Human MCP/CD46(Membrane Cofactor Protein) ELISA Kitα干擾（IFN-α）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

跨膜通道蛋白8抗體Human PSEN2(Presenilin-2) ELISA Kit尿瓊脂基礎(chǔ)