當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>> 姬姆薩染色液(10×Giemsa stain)
貨號 | FS-X10096 |
---|
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×100ml|2×500ml
貨號:FS-X10096
產(chǎn)品介紹:
用途: 血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色 注意事項: 細胞核呈紫紅色或藍紫色,胞漿呈粉紅色。含10×磷酸鹽緩沖液,1:1:8稀釋后使用,但磷酸鹽緩沖液稀釋后即配即用,不易保存。 儲存條件:室溫,24個月 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
嗜乳桿菌誘捕受體2抗體Human SERBP1 (Plasminogen activator inhibitor 1 RNA-binding protein) 人艾杜糖硫酯(IDS)免疫試劑盒
香菇腫瘤調(diào)亡/死亡受體5抗體Human CAPN15 (Calpain-15) 人癌癥促凝(CP)免疫試劑盒
平臍儒孢菌 核心蛋白聚糖抗體Human SGIP1 (SH3-containing GRB2-like protein 3-interacting protein 1) 人癌抗原27-29(CA 27-29)免疫試劑盒
冬蟲夏草雙特異性磷2抗體Human SH3BP5L (SH3 domain-binding protein 5-like) 人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl 免疫試劑盒
釀酒酵母21號染色體開放閱讀框106抗體Human SETX (Probable helicase senataxin) 人阿立新A(Orexin A)免疫試劑盒
哈茨木霉同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體Human SHCBP1 (SHC SH2 domain-binding protein 1) 人κB抑制蛋白激(IKK)免疫試劑盒
藍綠小四孢菌DVL3蛋白抗體Human SAV1 (Protein salvador homolog 1) 人γ谷酰轉(zhuǎn)移(GGT)免疫試劑盒
釀酒酵母DNA依賴蛋白激催化亞基抗體Human IREB2(Iron-responsive element-binding protein 2) 人γ-谷酰環(huán)化轉(zhuǎn)移(GGCT)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌GADD153抗體Human RFNG (Beta-1,3-N-acetylglucosaminyltransferase radical fringe) 人γ谷-半胱合成(γ-GCS)免疫試劑盒
短雙歧桿菌中間絲蛋白β-synemin抗體Human SASH1(SAM and SH3 domain-containing protein 1) 人γ干擾誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)免疫試劑盒
西班牙糖絲菌MAP激激活死亡域蛋白4C抗體Human SASH3 (SAM and SH3 domain-containing protein 3) 人γ干擾誘導單核因子(MIG/CXCL9)免疫試劑盒
匍枝根霉原變種橋粒糖蛋白4抗體Human RHO (Rhodopsin) 人γ干擾受體(IFN-γR)免疫試劑盒
桂花地霉動力蛋白3抗體Human RBPMS2 (RNA-binding protein with multiple splicing 2) 人γ干擾(IFN-γ)抗體免疫試劑盒
竹喙球菌δ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)/δ鏈接(δ-catenin)抗體Human SERGEF (Secretion-regulating guanine nucleotide exchange factor) 人γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
黃柄曲霉胞漿接頭蛋白Dok6抗體Human SELPLG (P-selectin glycoprotein ligand 1) 人γ分泌激活蛋白(PION)免疫試劑盒
鮭色鎖擲酵母胞漿接頭蛋白Dok5抗體Human ALOX15B(Arachidonate 15-lipoxygenase B) 人γ分泌免疫試劑盒
棘孢青霉Penicillium│aculeatum 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,介質(zhì):1.0mol/L 硝去乙酰車葉草
膠紅酵母Rhodotorula│mucilaginosa 質(zhì)量規(guī)格:1000mg/L,溶劑:5%鹽蝙蝠葛蘇林堿
大孢硬皮馬勃Scleroderma│bovista Fr. 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽杯莧甾
姬姆薩染色液(10×Giemsa stain)假單胞屬 乙二叔丁7-羥甲基葉綠a
黑曲霉 2'-氨基脫氧肌總黃酮
金黃殼囊孢 O-(N-Fmoc-2-aminoethyl)-O'-(2-carboxyethyl)-undeca蛋白磷
大腸埃希氏桿 3-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]叔丁酯6-磷葡萄糖脫氫
棒曲霉 甲基-PEG12-NHS酯肌
伯頓畢赤酵母 15-(Boc-氨基)-4,7,10,13-四氧雜十五烷D-葡萄糖
托魯斯山鏈霉 2,5-二氟苯甲氨基環(huán)烷羧
巨大芽孢桿 1H,1H,10H,10H-全氟-1,10-癸二異黃酮合成
擬粉紅鎖擲孢酵母 三氫過氧化物裂解
金色鏈霉 3,5-雙(三氟甲基)芐基?;D(zhuǎn)移
褶緣黑點口蘑 烯基(甲基)二甲基硅烷?;D(zhuǎn)移
擬青霉 7-氮雜-5-頻哪酯S轉(zhuǎn)移
釀酒酵母 乙烯基基硅烷羧酯
苛求芽孢桿 4--2-氟苯乙花生凝集
長柄鏈格孢 雙(2,4,5-三水楊正戊酯)草酯鈣離子ATP
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。