當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TVIM人波形蛋白ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產品僅用于科研
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
產品名稱 | VIM人波形蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human vimentin, VIM Elisa Kit |
貨號 | FS-H64402 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
MTMR14 肌管素相關蛋白14抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Oxyresveratrol
Pumilio 1 PUM1蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Acetylresveratrol
Exportin 5 核輸出蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Acetylresveratrol
PTBP1 核糖核結合蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml FmocLys(Mtt)OH
phosphoGIT1(Tyr554) G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1 現(xiàn)貨供應 0.1ml FmocThr(Bzl)OH
SH3TC2 脫髓鞘相關蛋白SH3TC2N抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml FmocLysOH
Phosphop53BP1 (Ser1778) p53結合蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml FmocLaspartic acid βbenzyl ester
ATRIP/TREX1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml FmocAsp(OH)OtBu
Lung Specific X Protein英文簡稱LUNX三腺檸檬裂解酶抗體 檢測范圍:280nmol/L48pg/mL
paternally expressed 10英文簡稱PEG10ATR抗體 檢測范圍:281nmol/L1000pg/mL
epididymis protein4英文簡稱HE4天門冬酰連接糖基11抗體 檢測范圍:282nmol/L48pmol/L
Serca英文簡稱Serca核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體 檢測范圍:283nmol/L8ng/mL
calmodulin英文簡稱CAM錨蛋白重復結構域蛋白11抗體 檢測范圍:284nmol/L48μg/mL
mannan binding lectin associated serine protease英文簡稱MASP非受體酪激酶cAbl抗體 檢測范圍:285nmol/L48U/L
hepatomaderived growth factor英文簡稱HDGF溶血脂?;D移酶β抗體 檢測范圍:286nmol/L400ng/mL
ephrinB3英文簡稱ephrinB3AFP4b蛋白抗體 檢測范圍:287nmol/L8ng/mL
heparin cofactor Ⅱ英文簡稱HCⅡ醛固還原酶家族1成員D1抗體 檢測范圍:288nmol/L48μg/mL
Hepatocellular carcinomaassociated protein TD26英文簡稱TD26肝血管生成素相關蛋白抗體 檢測范圍:289nmol/L16ng/mL
hepatocyte growth factor英文簡稱HNF4α自水解酶結構域5蛋白抗體 檢測范圍:290nmol/L1600pg/mL
interferon regulatory factor英文簡稱IRF?;o酶A硫酯酶8 檢測范圍:291nmol/L8ng/mL
interferon regulatory factor 4英文簡稱IRF4載脂蛋白A5抗體 檢測范圍:292nmol/L1000pg/mL
interferoninducible protein 4英文簡稱IFIT4溶血脂?;D移酶D抗體 檢測范圍:293nmol/L16pg/mL
Orphanin FQ英文簡稱OFQ載脂蛋白E3抗體 檢測范圍:294nmol/L24pg/mL
厚樸 Magnolia officinalis 規(guī)格:0.5g
玳瑁 Tortoise shell 規(guī)格:0.5g
仙人掌 Cactus 規(guī)格:10g
頭花蓼 Polygonum capitatum 規(guī)格:1.5g
土槿皮 Cortex Pseudolaricis 規(guī)格:2g
葉榕 Ficus microcarpa 規(guī)格:20g
防已 . 規(guī)格:1g
黃荊子 Huang Jingzi 規(guī)格:1g
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉) Rou Congrong (Guan Hua Rou Congrong) 規(guī)格:1g
沙苑子 Astragalus complanatus 規(guī)格:1g
阿膠 Donkey hide gelatin 規(guī)格:0.5g
半夏 Banxia 規(guī)格:1g
VIM人波形蛋白ELISA試劑盒實驗原理DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體Porcine SNRPC (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C) ELISA Kit
周期蛋白3抗體Porcine E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit
DNAJC9蛋白抗體Porcine DBP (DNA Binding Protein) ELISA Kit
DNA甲基轉移酶2抗體Porcine CDK9 (Cyclin Dependent Kinase 9) ELISA Kit
DNA甲基轉移酶3L抗體Porcine STAT6 (Signal Transducer and Activator of Tranion 6) ELISA Kit
二肽基肽酶10抗體Porcine AChRab (Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit
二肽氨基肽酶3抗體Porcine MT3 (Metallothionein 3) ELISA Kit
DNA復制相關元件結合因子抗體Porcine MBP/MBL (Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit
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