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貨號 | FS-X10107 |
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產(chǎn)品介紹:
用途: 主要用于從糞便中檢查蟲卵或原蟲 注意事項: 主要由碘組成,碘液濃度為1% 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
中文名稱:D'Autoni碘液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
貨號:FS-X10107
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
根瘤菌膜蛋白Derlin抗體Human NFAT5(Nuclear factor of activated T-cells 5) 人Na+/H+交換體3(NHE3)免疫試劑盒
藤黃微球菌二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移抗體Human PAPD4 (Poly(A) RNA polymerase GLD2) 人N1,N12-二乙?;?免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體Human NOD1 (Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 1) 人N(ε)羧乙基賴(CEL)免疫試劑盒
*灰葡萄孢菌間粘附分子非整合蛋白3抗體Human ODC1(Ornithine decarboxylase) 人N -甲基- D -天冬抗體IgG(NMDA Antibody IgG)免疫試劑盒
杰氏假單胞菌DNA依賴性蛋白激抗體Human OLIG1 (Oligodendrocyte transcription factor 1) 人MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)免疫試劑盒
霍亂弧菌磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human OPHN1 (Oligophrenin-1) 人MAX二聚化蛋白1(MXD1)免疫試劑盒
須殼孢磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human OPALIN (Opalin) 人MAP磷雙特異性磷1(DUSP-1)免疫試劑盒
斑玉蕈蓬亂蛋白2抗體Human OBFC1 (CST complex subunit STN1) 人L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒
文昌野野村氏菌防御α5抗體Human OCM(Oncomodulin-1) 人L-腎上腺免疫試劑盒
粉狀畢氏酵母鋅離子結(jié)合蛋白DTX2抗體Human NRARP (Notch-regulated ankyrin repeat-containing protein) 人L-乳脫氫(L-LDH)免疫試劑盒
NCI-H647(人肺癌)(通過STR鑒定)EYA3蛋白抗體Human OLIG1 (Oligodendrocyte transcription factor 1) 人L-基氧化(LAO)免疫試劑盒
乳桿菌屬痛感蛋白抗體Human OPALIN (Opalin) 人Klotho 免疫試劑盒
短波單胞菌屬翻譯延伸因子EF-1 α2抗體Human NHEJ1 (Non-homologous end-joining factor 1) 人KI-67抗原(Ki-67)免疫試劑盒
硫色曲霉延伸因子EF-1δ抗體Human NRP2 (Neuropilin-2) 人Jo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)免疫試劑盒
解脂假絲酵母解脂變種延伸因子EF-1 γ抗體Human OBFC1 (CST complex subunit STN1) 人IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)免疫試劑盒
雞腿菇磷化真核翻譯延長因子2抗體Human NSMAF (Protein FAN) 人Igγ3鏈C區(qū)(IGHG3)免疫試劑盒
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽三七總皂
中間根瘤菌Mesorhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,溶劑:沒食子乙酯
拉恩氏菌Rahnella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品黃芪黃
D'Autoni碘液茯苓 3-氨基-1-金剛烷海藻糖6磷合
閃光須霉 3-溴酮乙酯β-基合成
曲霉 DL-α-甲氧基硫
谷棒桿 3-溴-4-吡啶甲1-氨基-1-羧環(huán)烷
香草蘭根疾 3,5-二溴-4-吡啶甲乙氧化
鞘氨單胞屬 4-甲基-N-氧化物 一水合物維生D
葡萄座腔 4-硝基茴香硫β-硫代葡萄糖水解
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 2-溴-1-氟-4-色P450
Marivirga tractuosa 3,4-二甲氧基苯硫絲裂原活化蛋白激20
蠟狀芽孢桿 甲基-β-D-吡喃葡萄糖半水合物原卟啉原氧化
食樹脂新鞘氨 4-氟-1-茚酮查爾酮還原
光孢黃叢枝珊瑚 壬基-β-D-吡喃葡糖4CL-肉桂4-羥基化
約利曼漆斑 3-氨基-4-吡唑甲乙酯天冬酰合成
金黃色葡萄球金黃亞種 3-氟-5-甲氧基苯甲β內(nèi)酰
Pseudarthrobacter 雙(三-o-甲苯磷)鈀(0)α半乳糖
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