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綠藻保色液Ⅱ

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 16:39:59瀏覽次數:155次

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貨號 FS-X10194
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FOXO4/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgG沒食子酯 98%
Phospho-FoxO4

中文名稱:綠藻保色液

英文名稱:

產品規(guī)格:100ml

貨號:FS-X10194

產品介紹:

用途:

用于綠藻的保色保存。

注意事項:

主要由醋酸銅、福爾馬林等組成。

儲存條件:室溫,避光,12個月

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

布氏艾美耳球蟲溶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體Human TROVE2 大鼠維生B6(VB6)免疫試劑盒

黃傘溶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體Human TROAP 大鼠維生B12(VB12)免疫試劑盒

尖孢鐮刀菌促性腺激釋放激2抗體Human TRPC4 大鼠維生A(VA)免疫試劑盒

黑曲霉基葡萄糖6-硫酯抗體Human TRPC4AP 大鼠維甲受體應答蛋白2(RARRES2)免疫試劑盒

蠟樣芽孢桿菌高爾基體膜相關蛋白抗體Human TRPA1(Transient receptor potential cation channel subfamily A member 1) 大鼠微纖絲相關糖蛋白3(MFAP3)免疫試劑盒

冬蟲夏草高爾基體膜相關蛋白5抗體Human TRIM69 大鼠微管相關蛋白2(MAP-2)免疫試劑盒

灰色困難鏈霉菌高爾基體膜相關蛋白7抗體Human TRPC5 大鼠微管蛋白β3(TUBB3)免疫試劑盒

弗雷德里克斯堡假單胞菌高爾基復合體CFR1抗體Human TRIM67 大鼠網膜(omentin)免疫試劑盒

黑化鏈霉菌高爾基體蛋白97抗體Human TRIM9 大鼠晚期氧化蛋白產物(AOPP)免疫試劑盒

釀酒酵母高爾基體蛋白A亞基4抗體Human TRIP10 大鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)免疫試劑盒

膠孢高爾基體外周膜蛋白1抗體Human TRIM37 大鼠晚期糖基化端產物特異受體(AGER)免疫試劑盒

氏假單胞菌高爾基體膜蛋白抗體Human TRIM38(tripartite motif-containing 38)大鼠蛙皮,雨蛙肽免疫試劑盒

假單胞菌高爾基體磷蛋白6抗體Human TRIM39 大鼠脫氧膠原吡啶交聯(DPD)免疫試劑盒

纖細白僵菌高爾基SNAP受體復合物1抗體Human TRIP13 大鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)免疫試劑盒

艾比湖嗜鹽堿紅菌谷草酰乙轉1樣蛋白1抗體Human TRIM44 大鼠脫氫表雄(DHEA)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌G蛋白偶聯受體52抗體Human TRIM41 大鼠褪黑受體免疫試劑盒

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:干燥劑用金石蠶

枯草芽孢桿菌Bacillus│sublitis 質量規(guī)格:pellets,3-5 mm升麻-3-O-α-L-拉伯糖

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格:pellets, 2.5-3.5 mm木蝴蝶B
綠藻保色液賴芽胞桿屬 4,5-二-2-芐基-3(2H)-噠透明質

擬盤多毛孢 7-氨基-1-甲基吲唑透明質

根霉屬 3-乙酮突觸

球孢白僵 4-溴-2-氟-5-褪黑

地衣芽孢桿 三(4-苯)脫氫表雄酮

毛韌革 2-氨基-4--3-吡啶脫氧吡啶;脫氧吡啶啉

微球 2-噻唑-4-甲乙酯晚期糖基化終末產物

產氣莢膜梭       C型 2-溴-4-氨基噻唑鹽晚期糖基化終末產物受體

根瘤 1-甲磺?;?2-咪唑烷酮晚期氧化蛋白產物

耐鹽四聯球 4-氨基-3,5-二甲酯網膜

紫薇布勒酵母 5--2-氨基噻唑維生D

香菇 1-甲基咪唑-4-甲乙酯維生D25羥化

枯草芽胞桿枯草亞種 5-甲?;畻罴柞ゾS生D3

細枝孢 2-甲基-4-羥基苯甲維生K2

嗜中溫寒冷桿 3,5-二羥基胃蛋白

 


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