苔蘚保色液-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X10201

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中文名稱：苔蘚保色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：50ml

貨號：FS-X10201

產(chǎn)品介紹:

用途：

用于液體浸制苔蘚標(biāo)本的制作。用于苔蘚標(biāo)本的保色。

注意事項：

主要由硫酸銅等組成。

儲存條件：室溫，避光，12個月

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

雜色曲霉鵝細(xì)小病GPV抗體Human TOMM6 大鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)免疫試劑盒

鉛色青霉胃泌/蛙皮抗體Human TOMM34 大鼠絨毛膜促性腺激(CG)免疫試劑盒

大麗輪枝孢3-磷甘油脫氫（兔來源免疫組化用抗體）Human MT 大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒

余速測盒（檢測范圍0～1mg/L）膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體Human TOMM7 大鼠熱休克因子1(HSF1)免疫試劑盒

根瘤菌β半乳糖抗體Human TOP3A 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)免疫試劑盒

大腸埃希菌gamma基丁B型受體1抗體Human TNS1 大鼠熱休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)免疫試劑盒

細(xì)黃鏈霉菌乳糖變種G蛋白/鳥結(jié)合蛋白抗體Human TNIP2 大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒

托姆青霉GDNF家族受體α4抗體 GDNFRα4Human TNIP1 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒

克魯斯假絲酵母神經(jīng)節(jié)肽抗體Human TNS3 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)免疫試劑盒

鳳尾菇谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移抗體Human TNS4 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒

大豆慢生根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR113蛋白抗體Human TMOD3 大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒

醋鈣不動桿菌甘肽受體1抗體Human MCHR2(Melanin-concentRating hormone receptor 2) 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)免疫試劑盒

雙孢蘑菇生長抑制DNA損傷基因34抗體Human TNK1 大鼠缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒

發(fā)酵乳桿菌生長分化因子1抗體Human TNP1 大鼠固(ALD)免疫試劑盒

柳巴克利酵母葡萄糖激抗體Human TMPRSS5 大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)免疫試劑盒

汞對照液G蛋白偶聯(lián)受體78抗體Human EEF1A1(Elongation factor 1-alpha 1) 大鼠去乙?；囸I激(dGHRL)免疫試劑盒

青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：光譜純 ,≥99%甜橙黃

: HBUM80981資源名稱: 鏈霉菌質(zhì)量規(guī)格：for spectroscopy,≥99.5%番瀉元B

山茶刺盤孢Colletotrichum│coccodes (Wallr.) S. Hughes 質(zhì)量規(guī)格：SP番瀉元A
苔蘚保色液橙色桿屬 2-二氟胰高血糖樣肽1

貝倫格葡萄座腔梨生?；?/span> 4,4'-(1-甲基亞乙基)雙(2-)胰高血糖樣肽2

豌豆根瘤 5-溴-2-三氟甲基嘧啶胰脂肪

氧化節(jié)桿 1-乙氧基-4-乙炔基苯乙脫氫

細(xì)孢毛霉 2-溴-1,3-二苯甲乙二1

植物乳桿植物亞種五氟乙酯乙脫氫

吸水鏈霉 1-溴-4-(反式-4-n-戊基環(huán)己基)苯乙酰CoA

pMV306hsp+LuxG13（addgene26161） 4-(3-甲氧基氧基)苯甲乙酰CoA羧化

豌豆根瘤異丁酰醋甲酯乙酰

枯草芽孢桿基環(huán)戊烷乙酰受體抗體

立枯絲核 (R)-(+)-2-乙酰氧基琥珀酐乙酰酯

多主葡萄殼 2,7-二羥基-9-芴酮乙酰轉(zhuǎn)移

食鹿角菜假交替單胞對十二烷基苯磺酰疊氮乙酰羧化

番茄枯萎病 1-己基吡啶六氟磷鹽乙酰肝

膠凍樣類芽孢桿左炔型肝炎E抗原
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)