細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9774

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號
細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)	DiOC18(3)	10mg	FS-X9774

產(chǎn)品介紹：

本探針是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一，呈現(xiàn)綠色熒光。DiO是一種親脂性膜染料，進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴散逐漸使整個細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。DiO在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱，僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強的熒光。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光，DiO和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中，大激發(fā)波長為484nm，大發(fā)射波長為501nm。

：34215-57-1

分子式：C53H85ClN2O6

分子量：881.72

DiO可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF，溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當(dāng)加熱，并用超聲處理以促進(jìn)溶解。

DiO被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。DiO通常不會明顯影響細(xì)胞的生存力(viability)。DiO對于細(xì)胞膜染色的熒光強度通常要低于DiI，有時對于某些經(jīng)過固定的組織的染色效果欠佳。

DiO除了簡單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外，還可以用于檢測細(xì)胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移，通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細(xì)胞膜上的擴散，檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。

用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時，DiO的常用濃度為1-30μM，常用的濃度為5-10μM。DiO可以直接染色活的細(xì)胞或組織，染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細(xì)胞或組織，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定，使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?dǎo)致熒光背景較高。

注意事項：熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

儲存條件：4℃避光，有效期一年。

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)英文名：BRCA2 分裂周期樣激2抗體包裝25g

乳鐵傳遞蛋白(LTF)英文名：LTF 分裂周期樣激3抗體包裝5g

乳脫氫B(LDHB)英文名：LDHB 17號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g

乳過氧化物(LPO)英文名：LPO 17號染色體開放閱讀框53抗體包裝25g

肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1A(CPT1A)英文名：CPT1A 17號染色體開放閱讀框57抗體包裝5g

肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移(CRAT)英文名：CRAT 17號染色體開放閱讀框64抗體包裝1g

融合蛋白(FUS)英文名：FUS 17號染色體開放閱讀框66抗體包裝250mg

溶質(zhì)載體家族30成員7(SLC30A7)英文名：SLC30A7 17號染色體開放閱讀框74抗體包裝1g

溶質(zhì)載體家族30成員6(SLC30A6)英文名：SLC30A6 17號染色體開放閱讀框75抗體包裝250mg

溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)英文名：SLC30A5 17號染色體開放閱讀框77抗體包裝5g

溶質(zhì)載體家族30成員4(SLC30A4)英文名：SLC30A4 17號染色體開放閱讀框78抗體包裝1g

溶質(zhì)載體家族30成員3(SLC30A3)英文名：SLC30A3 維調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體包裝5g

溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)英文名：SLC30A10 17號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g

溶質(zhì)載體家族30成員1(SLC30A1)英文名：SLC30A1 17號染色體開放閱讀框97抗體包裝250mg

溶血?；D(zhuǎn)移4(LPCAT4)英文名：LPCAT4 貓眼綜合征染色體候選基因1抗體包裝100g

猴頭菌Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒蔗糖;Sucrose

芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：945-1030 ug /mg,二物轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒正丁基酞;3-n-Butylphath

結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：效價測定轉(zhuǎn)谷酰2C多肽試劑盒知母皂B;Anemarsaponin
細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)多主葡萄殼 3--2-甲氧基砒啶血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物

枯草芽孢桿 5--2-甲氧基吡啶血紅結(jié)合蛋白

瓜亡革 5-溴-2-甲氧基-3-硝基砒啶血紅氧合1

平菇 3-溴-2-甲氧基吡啶血漿α顆粒膜蛋白

木糖葡糖醋桿鎢鈉血漿淀粉樣蛋白P

釀酒酵母 2,6-二苯甲血漿抗凝蛋白C

美澳型核果褐腐病 3-溴-2-羥基吡啶血漿抗凝蛋白S

鼠傷寒沙門氏 2-羥基-5-溴吡啶血漿絲蛋白抑制劑

殼溴化鋰水合物血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1

熱帶假絲酵母 3,5-二氟-4-異氧基血清白蛋白

枇杷假尾孢褐斑病 4-羥基-6,7-二甲氧基喹啉血清低半乳糖化IgA1

香菇間氟苯磺酰血清淀粉樣蛋白A

毛簇木霉 4-氨基-2-氟鹽鹽血清淀粉樣蛋白A1

解淀粉芽孢桿植物亞種 L-叔丁酯鹽鹽血清鐵

禽腺病 3,5-二水楊血清鐵蛋白

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。