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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TDPT人皮膚蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | DPT人皮膚蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human dermato-pontin, DPT Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H64343 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
Phosphop70 S6 Kinase Beta (Thr228) 核糖體S6蛋白激酶β2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml N2Acetyl9(2acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)
Phosphop70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) 核糖體S6蛋白激酶β2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Adenosine 3′,5′cyclic Monophosphorothioate, 8Chloro, RpIsomer, Sodium Salt
phosphoP70 S6 Kinase beta (Ser371) 核糖體S6蛋白激酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml LAdenosine
RPS6KA1/p90RSK/RSK1 絲/蘇激酶p90RSK蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Adenosine2'monophosphate
Phosphop90RSK(Ser380) 絲/蘇激酶p90RSK蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Adenosine 3'Monophosphate Hydrate
Phosphop90RSK (Thr359/Ser363) 絲/蘇激酶p90RSK蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Adenosine Amine Congener
Phosphop90RSK (Thr573) 絲/蘇激酶p90RSK蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Adenosine 5'diphposphate, trisodium salt
phosphoRPS6KA1(Thr359) 絲/蘇激酶p90RSK蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Adenosine 3′,5′cyclic monophosphate sodium salt monohydrate
LLactate Dehydrogenase英文簡(jiǎn)稱LLDH巴德畢德氏綜合征蛋白BBS6抗體 檢測(cè)范圍:6400nmol/L160U/L
Androstenone英文簡(jiǎn)稱ADT減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 檢測(cè)范圍:6401nmol/L12nmol/L
asparaginyl hydroxylase英文簡(jiǎn)稱ASP有絲分裂周期蛋白MPP9抗體 檢測(cè)范圍:6402nmol/L24U/L
TIMP1英文簡(jiǎn)稱TIMP1周期調(diào)控蛋白D1抗體 檢測(cè)范圍:6403nmol/L20ng/mL
TIMP2英文簡(jiǎn)稱TIMP2肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 檢測(cè)范圍:6404nmol/L16ng/mL
pyridinoline英文簡(jiǎn)稱PYD黑素皮質(zhì)素受體4抗體 檢測(cè)范圍:6405nmol/L8ppb
growth;differentiation factor 8英文簡(jiǎn)稱FGF8黑素皮質(zhì)素受體5抗體 檢測(cè)范圍:6406nmol/L2000pg/ml
Cathepsin L 英文簡(jiǎn)稱CathL 甲狀腺激素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7/8抗體 檢測(cè)范圍:6407nmol/L100U/L
BrucellaIgG英文簡(jiǎn)稱BrucellaIgG自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體 檢測(cè)范圍:6408nmol/L800ng/mL
Dopachrome Tautomerase英文簡(jiǎn)稱DCT梅克爾格魯伯綜合征相關(guān)蛋白抗體 檢測(cè)范圍:6409nmol/L1000U/L
CHLAIgG antibody英文簡(jiǎn)稱CHLAIgG Ab酪單氧酶微管相關(guān)蛋白MICAL抗體 檢測(cè)范圍:6410nmol/L80ng/mL
Opioids英文簡(jiǎn)稱Opioids基質(zhì)金屬蛋白酶18/19抗體 檢測(cè)范圍:6411nmol/L10ng/mL
Bone morphogenetic protein 12英文簡(jiǎn)稱BMP12肌管素相關(guān)蛋白2抗體 檢測(cè)范圍:6412nmol/L2000pg/ml
Methionine英文簡(jiǎn)稱MO單氧酶A+B抗體 檢測(cè)范圍:6413nmol/L10ng/mL
phosphoenolpyruvate carboxykinase 1英文簡(jiǎn)稱PEPCK1增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體 檢測(cè)范圍:6414nmol/L320U/L
腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: TNFRSF1A ELISA Kit
Mouse granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 顆粒酶B(Gzms-B)酶聯(lián)免疫試劑盒
MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanImmunoglobulinM,IgMELISAKit免疫球蛋白M規(guī)格:48T/96T
微型RNA(miRNA)同位素探針制備試劑盒10次
ELISAKitAmAC-1巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1規(guī)格:48T/96T
牛脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) 酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊CD14分子(CDl4)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat cluster Of differeiation,CDl4 ELISA Kit
免疫球蛋白G3(IgG3)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: IgG3 ELISA Kit
RatAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠ酶聯(lián)免疫試劑盒血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδ酶聯(lián)免疫試劑盒CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humandynamin2,DNM2ELISAKit發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
DPT人皮膚蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理前列腺素氧化環(huán)化酶1抗體Porcine COL17 (Collagen Type XVII) ELISA Kit
Ⅰ型膠原抗體Porcine MMP-11 (Matrix Metalloproteinase 11) ELISA Kit
Ⅴ型膠原抗體Porcine IGFBP-5 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5) ELISA Kit
Ⅹ型膠原抗體Porcine PTGIS (Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit
周期素F抗體Porcine TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit
泛素連接酶CUL7蛋白抗體Porcine CX40 (Connexin 40) ELISA Kit
甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體Porcine COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體Porcine FGF6 (Fibroblast Growth Factor 6) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
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