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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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尼氏染色液(焦油紫法)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 15:38:36瀏覽次數(shù):161次

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貨號(hào) FS-X10071
尼氏染色液(焦油紫法)正在熱銷的產(chǎn)品:ABCG4/FITC 熒光標(biāo)記抗ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體IgG1--3-化咪唑嗡 98%
c-Abl /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠非受體酪氨激c-Abl抗體IgG1-辛-3-咪唑四氟鹽 98%
ABL2/FITC 熒光標(biāo)記ABL2抗體IgG1--3-辛化咪唑鎓 ≥97.0% (HPLC)
ACA11 /FITC 熒光標(biāo)記兔抗擬南芥ACA11抗體Ig

產(chǎn)品介紹:

用途:

尼氏物質(zhì)、神經(jīng)元染色

注意事項(xiàng):

主要由焦油紫染色液、分化液等組成。尼氏物質(zhì)呈紫色背景接近于無(wú)色。

儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月

中文名稱:尼氏染色液(焦油紫法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:3×100ml

貨號(hào):FS-X10071

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

煙管菌表面趨化因子受體7抗體Human CCR7(C-C chemokine receptor type 7) 人鈣衛(wèi)蛋白免疫試劑盒

糖化酵母色c氧化10抗體Human DEFA1(Defensin Alpha 1, Neutrophil) 人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)免疫試劑盒

少根根霉戴爾變種CRTAM抗體Human CLCF1(Cardiotrophin-like cytokine factor 1) 人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)免疫試劑盒

越桔假絲酵母單核趨化蛋白4抗體Human MSTN(Growth/differentiation factor 8) 人鈣離子通道抗體(IgG)免疫試劑盒

芽孢桿菌NK抑制性受體2DL3抗體Human SLC25A20(Mitochondrial carnitine/acylcarnitine carrier protein) 人鈣結(jié)合蛋白S100A14 免疫試劑盒

葡萄座腔菌CRX抗體Human AGTR1(Type-1 angiotensin II receptor) 人鈣結(jié)合蛋白S100A13 免疫試劑盒

稻生黃單胞菌*CD8抗體Human SFRP4(Secreted frizzled-related protein 4) 人鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌磷化原癌蛋白CBL2抗體Human CS(CitRate synthase, mitochondrial) 人鈣激活中性蛋白6(CAPN6)免疫試劑盒

釀酒酵母磷化原癌蛋白CBL2抗體Human SFTPB(Pulmonary surfactant-associated protein B) 人鈣激活中性蛋白1(CAPN1)免疫試劑盒

竹針孢座囊菌磷化周期依賴激2抗體Human PLA2G4A(Cytosolic phospholipase A2) 人鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)免疫試劑盒

局限青霉磷化周期依賴激2抗體Human SFTPC(Pulmonary surfactant-associated protein C) 人鈣調(diào)磷(CaN)免疫試劑盒

新疆纖細(xì)芽孢桿菌分裂周期蛋白25抗體Human NDUFS8(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 8, mitochondrial) 人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)免疫試劑盒

Amycolatopsis磷化分裂周期蛋白25抗體Human PRAP1(Proline-rich acidic protein 1) 人鈣蛋白抑制蛋白(T)免疫試劑盒

松杉靈芝磷化分裂周期蛋白25抗體Human SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) 人鈣蛋白抑抗體(AT-DⅣ)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化分裂周期蛋白25抗體Human NDUFS7(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 7, mitochondrial) 人鈣蛋白2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)免疫試劑盒

相思根瘤菌半胱蛋白8抗體Human CXCL14(C-X-C motif chemokine 14) 人鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2(CAMK 2)免疫試劑盒

根霉Rhizopus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%乙氧基白屈菜紅堿

魯氏接合酵母Zygosaccharomyces│rouxii 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品芫花

枝孢Cladosporium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥90% (HPLC)3,′6-二芥子?;崽?/span>
尼氏染色液(焦油紫法)大腸埃希氏 Z-谷安叔丁基酯過(guò)氧化物

釀酒酵母 對(duì)氟乙酯還原型

霍氏瓶霉 DL-10-樟腦磺海藻糖

釀酒酵母 3-甲基戊乙酯紅色葉綠降解產(chǎn)物還原

漢遜德巴利酵母 2-溴對(duì)苯二胡蘿卜

疣孢青霉 5-溴-2-糠環(huán)磷腺

無(wú)花果擬盤多毛孢 2,6-二叔丁基吡啶活性氧

竹瘤座 2-甲基煙酰肌激

食用香料  折光指數(shù)、相對(duì)密度  3-溴-2-氟苯脫落

鹽敏芽孢桿 DL-谷氨酰幾丁質(zhì)

多帶革孔 性棕14己糖激

少根根霉 N,1-二-Fmoc-L-組交替氧化

多主葡萄殼 3-硝基三氟甲苯精

長(zhǎng)雙歧桿長(zhǎng)亞種 苯并噻吩-2-抗壞血過(guò)氧化物

滑菇 N-Boc-DL--2-甲可溶性蛋白質(zhì)

 


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