13524666654
當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞組織染色>> 溶酶體紅色熒光探針
| 貨號 | FS-X9777 |
|---|
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
中文名稱：溶酶體紅色熒光探針
英文名稱：Lysosome Tracker Red
產(chǎn)品規(guī)格：50μl
貨號：FS-X9777
產(chǎn)品介紹:
本探針一種溶酶體紅色熒光探針，可以用于活細胞溶酶體特異性熒光染色。 本探針為采用Molecular Probes公司的DND 99進行了熒光標記的帶有弱堿性的熒光探針，可以選擇性地滯留在偏酸性的溶酶體中，從而實現(xiàn)對于溶酶體的特異性熒光標記。中性紅(Neutral Red)和橙(Acridine Orange)也都可以對溶酶體進行熒光染色，但中性紅和橙的染色缺乏特異性。 本探針呈紅色熒光，檢測時的大激發(fā)波長為577nm，大發(fā)射波長為590nm。按照1:20000的比例稀釋，可以配制1000ml探針工作液。 儲存條件：-20℃避光，有效期6個月。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
輕肽鐵蛋白(FTL)英文名：FTL 1號染色體開放閱讀框220抗體包裝5g
輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)英文名：NEFL 鈣磷蛋白1抗體包裝1g
親環(huán)B(CYPB)英文名：CYPB 鈣磷蛋白2抗體包裝25mg
親環(huán)A(CYPA)英文名：CYPA 磷化通道相互作用蛋白3抗體包裝1g
鞘磷脂(SPH)英文名：SPH 16號染色體開放閱讀框61抗體包裝250mg
鞘1磷酯受體1(S1PR1)英文名：S1PR1 視錐感光環(huán)磷鳥門控通道蛋白CNG3抗體包裝5g
鞘1磷酯裂解1(SGPL1)英文名：SGPL1 環(huán)核門控陽離子通道蛋白β3/CNG-β3抗體包裝1g
橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)英文名：DSC1 非受體酪激c-Abl抗體包裝100MG
強啡肽(Dyn)英文名：Dyn 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白152抗體包裝100MG
前腦啡肽(PENK)英文名：PENK 甘油二酯磷轉(zhuǎn)移抗體包裝25mg
前列腺性磷(ACP3)英文名：ACP3 嗜鉻粒B抗體包裝1g
前列腺E受體2(EP2)英文名：EP2 血管加壓激活鈣啟動受體蛋白1抗體包裝5g
前列腺E合2(PTGES2)英文名：PTGES2 色P450Ⅱj3抗體包裝1g
前膠原C端蛋白增強子1(PCPE1)英文名：PCPE1 鈣激活離子通道4抗體包裝250mg
前動力蛋白受體1(PKR1)英文名：PKR1 周期依賴性激6抗體包裝5g
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格：> 98%,合物標準品腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子試劑盒紫草;Lithosprmoside
拘櫞桿菌Citrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98.5%,BR,二合物腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3試劑盒豬去氧膽;Hyodeoxycholic
: F536資源名稱: 黃曲霉 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98%腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2試劑盒竹節(jié)香附A;Raddeanin(Ane
溶酶體紅色熒光探針黃曲霉 2-溴-3-氟循環(huán)復(fù)合物
黃粘蓋牛肝 3-氨基-2-硝基吡啶煙酰單核轉(zhuǎn)移3
宇佐美曲霉 2-二苯基膦-6-煙酰腺二核
彎孢 1-甲氧基羰酰氨基-7-萘酚煙酰腺二核磷
雜色曲霉 N-異基-4-甲酰基苯甲酰炎癥因子3;穿透
肺形側(cè)耳 乙肼氧化低密度脂蛋白
Au141（黑木耳） 1-羥基-2-萘苯酯氧化低密度脂蛋白抗體
廣食黃桿 對氨基苯甲-3-磺氧化高密度脂蛋白
聚生殼 N-(三苯甲基)-L-天冬酰氧化磷脂
草假單胞 乙二四乙四鈉四水化合物氧化型
松口蘑 2-苯基鈉四水合物
青榨槭葉斑病 2-氧-1-咪唑烷一氧化氮
多根硬皮馬勃 羅哌鹽鹽一氧化氮合成
大腸桿 4-甲硫基衣原體抗體
葡枝根霉 4--2-胰蛋白
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責，儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
儀表網(wǎng)