13524666654
當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 亞歷山大染色液
| 貨號 | FS-X10175 |
|---|
產(chǎn)品介紹:
用途： 花粉染色 注意事項： 又稱Alexanderran染色液 儲存條件：室溫，避光，12個月 |
中文名稱：亞歷山大染色液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50ml|100ml
貨號：FS-X10175
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
枯草芽孢桿菌腺環(huán)化Gα蛋白/Gαs/olf抗體Human VCPIP1 猴皮質(zhì)(COR)免疫試劑盒
毛栓孔菌周期蛋白G相關(guān)激抗體Human VEZT 猴尿微量白蛋白(ALB)免疫試劑盒
藍(lán)微褐鏈霉菌糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體Human VGLL4 猴可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒
紫紅鏈霉菌環(huán)指蛋白27抗體Human CNDP1(Beta-Ala-His dipeptidase) 猴可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒
節(jié)桿菌透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體Human VILIP 3 猴抗肝膜抗體(LMA)免疫試劑盒
猴頭菌G蛋白偶聯(lián)受體激6抗體Human VMAT2 猴精1(ARG1)免疫試劑盒
尖頂鹽單胞菌Rho GTP激活蛋白26抗體Human VMA21 猴甲狀腺(T4)免疫試劑盒
嗜果黑星菌G蛋白α抑制蛋白1抗體Human VASH2(Vasohibin-2) 猴環(huán)磷腺(cAMP)免疫試劑盒
糞腸球菌生長停滯特異性蛋白6抗體Human VAMP4 猴環(huán)磷鳥(cGMP)免疫試劑盒
努比鹵地?zé)o氧芽孢桿菌合成抗體Human VAMP5 猴骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體2型(BMPR2)免疫試劑盒
草青霉血型糖蛋白δ抗體Human VAMP7/TI-VAMP 猴S轉(zhuǎn)移A1(GSTA1)免疫試劑盒
卡伍爾鏈霉菌糖皮質(zhì)激誘導(dǎo)亮拉鏈蛋白抗體Human VANGL1 猴肝炎病的受體1/腎損傷分子1/KIM1(HAVCR1)免疫試劑盒
擬胞囊菌γ-谷酰轉(zhuǎn)肽6抗體Human VAMP8 猴分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌G基丁受體δ/GABAA Rδ抗體Human VANGL2 猴催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
膠胞G基丁受體γ1/GABAA Rγ1抗體Human VAPA 猴促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
美濃鏈霉菌磷化γ基丁γ2受體抗體Human TOP2B(DNA topoisomerase 2-beta) 猴促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)免疫試劑盒
白色鏈霉菌Streptomyces│albus 質(zhì)量規(guī)格：>99.8%(GC)鉤吻;鉤吻堿
大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種Metarhizium│majarosporae 質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué),≥99.9%鉤吻子
嗜冷桿菌(加詞待譯)Psychrobacter│piscatorii 質(zhì)量規(guī)格：多肽合成葫蘆E
亞歷山大染色液羊泰勒蟲（張家川株-2） 2,4,6-三單氧化
曲霉平展變種 2-氨基-3,4-二甲單核趨化蛋白1
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 4-氨基-3-溴苯甲膽固
福氏志賀氏 1-(3-氨基基)咪唑膽固7α羥化
砂和速測包 2,4-二氟苯酮膽紅
蜂房哈夫尼 1--3-甲基-2-乙酰化
豌豆根瘤* 乙酰轉(zhuǎn)移
假單胞屬 2,4,6-三-5-嘧啶甲蛋白多糖
屎腸球 4-溴-2-氟-6-硝苯蛋白激A
蘇云金芽孢桿 4--5-硝基吡啶-2-蛋白激C
赭裸傘 2--5-氟苯肼鹽鹽蛋白激G
豇豆慢生根瘤 3--9苯基咔唑蛋白酪磷1B
產(chǎn)氨短桿 5-氟苯并噻吩-2-蛋白激活受體2
球形節(jié)桿 3-溴-4-氟苯乙低密度脂蛋白
瓜類鞘氨單胞 3-羧酯苯低密度脂蛋白膽固
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
儀表網(wǎng)