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當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>> 蘇丹Ⅲ酒精飽和溶液
| 貨號 | FS-X10079 |
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培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱：蘇丹Ⅲ酒精飽和溶液
英文名稱：
產品規(guī)格：100ml
貨號：FS-X10079
產品介紹:
用途： 紅色溶液，常用于脂肪染色，可用于油脂是否存在的檢驗 注意事項： 主要由蘇丹Ⅲ、乙醇組成。 儲存條件：室溫，避光，12個月 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
白地霉分裂周期相關蛋白Human RAB14(Ras-related protein Rab-14) 人低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒
卷枝毛霉灰藍變型豬瘟病抗體Human TACR3(Neuromedin-K receptor) 人低分子質量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌16號染色體開放閱讀框72抗體Human TAGLN3(Transgelin-3) 人登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)免疫試劑盒
發(fā)酵乳桿菌補體C4 γ 鏈蛋白抗體Human ATP7A(Copper-transporting ATPase 1) 人登革熱抗體(DF-Ab)免疫試劑盒
巴西曲霉補體C4d-A蛋白抗體Human NEDD9(Enhancer of filamentation 1) 人登革熱(DF)抗體(IgG)免疫試劑盒
黃色短桿菌補體C4b-A蛋白抗體Human HLA-DRB5(HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 5 chain) 人的牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒
中慢生華癸根瘤菌磷化整合β2/Integrin β2抗體Human S100A12(Protein S100-A12) 人蛋白質二硫鍵異構(PDI)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌磷化整合β2/Integrin β2抗體Human MCTS1(Malignant T cell-amplified sequence 1) 人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)免疫試劑盒
大腸埃希菌4號染色體開放閱讀框28抗體Human SLC25A4(ADP/ATP translocase 1) 人蛋白水解誘導因子/皮離蛋白(PIF/DCD)免疫試劑盒
產氣莢膜梭菌 C型陽離子通道相關蛋白2抗體Human PLEKHO1(Pleckstrin homology domain-containing family O member 1) 人蛋白體(prosome,macropain)亞基,β型,2(PSMB2)免疫試劑盒
單形擬桿菌陽離子通道相關蛋白3抗體Human GALC(Galactocerebrosidase) 人蛋白體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)免疫試劑盒
長赤細菌液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體Human FAM214A(Protein FAM214A) 人蛋白激活復合體亞基2(PSME2)免疫試劑盒
靈芝(紅芝, 赤芝)鈣調磷B相關蛋白2抗體Human SERPINB13(Serpin B13) 人蛋白3特異性抗中性粒胞質抗體(PR3-ANCA)免疫試劑盒
輪枝孢CHRAC1蛋白抗體Human PTGDR(Prostaglandin D2 receptor) 人蛋白3抗體(PR3Ab)免疫試劑盒
嗜根寡養(yǎng)單胞菌ATP依賴的解螺旋抗體Human ABCA7(ATP-binding cassette sub-family A member 7) 人蛋白3(PR3)免疫試劑盒
多節(jié)孢屬X染色體開放閱讀框6抗體Human TCF3(Transcription factor E2-alpha) 人蛋白磷2(2A),催化亞基,β亞型(PPP2CB)免疫試劑盒
加納鏈霉菌Streptomyces│ghanaensis Wallhäusser et al. 質量規(guī)格：分析標準品藤皂H
: DSM29ATCC6344CCM2051NCIB8198NCTC6352NRRLB-383資源名稱: 蜂房類芽孢桿菌 質量規(guī)格：≥98.0%(GC)瓜子金皂己
苛求芽孢桿菌Bacillus│fastidiosus den Dooren de Jong 質量規(guī)格：分析標準品,≥99%(GC)柳穿魚黃
蘇丹Ⅲ酒精飽和溶液雜色云芝 (S)-1-(2,6-二-3-氟苯基)乙磷脂酰肌
桔青霉 2-羥基-3-甲氧基磷脂酰
蠟狀芽孢桿 (2S,4R)-1-((S)-2-(環(huán)戊氧羰基))-3,3-二甲基丁酰基)-4-羥基吡咯烷-2-羧脫氫抗壞血還原
松口蘑 3--5-氮雜7-乙氧基-3-異吩惡唑酮-脫乙基
釀酒酵母 4-(1,2-苯并異噻唑-3-基)-1-哌脯肽
鮑魚側耳 2-乙酰-3-氟吡啶硫代反應物
竹針孢座囊 N-乙基咔唑尼克酰-N-甲基轉移
梨多細源 (R)-(-)-3-羥基四尼克酰氨基轉移
嗜鹽動性球 N'-芴甲氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴磷二酯5
密歇根克雷伯氏 1-萘磺酰脂多糖
平田頭菇 1-萘磺酰β葡聚糖
硒砷芽孢桿 2,5-二二磷核酮糖羧化
裴氏著色霉 1-甲基-1H-吡唑-5-頻哪酯酮羧化
釀酒酵母 2-乙基蒽醌球蛋白
瑞山海源 2,5-二氟吡啶花葉病
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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