吉姆薩染色液-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9784

產(chǎn)品介紹:

本品以進口的吉姆薩色素、甲醇為主要原料，含*襯染劑，經(jīng)研磨配制而成，能呈現(xiàn)出清晰的細胞染色效果。經(jīng)常用于組織切片、血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色。吉姆薩染色液由吉姆薩貯存液(10×)和磷酸鹽緩沖液組成，10×貯存液可以單獨使用，也可以1:9混合成工作液后使用。

吉姆薩色素是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。吉姆薩染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同，吉姆薩染色液對胞漿著色力較強，能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度，特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒，著色清晰，但是對細胞核著色偏深,核結(jié)構(gòu)顯色不佳，故吉姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。

一、一步法涂片染色

1、吉姆薩工作液的配制：

按吉姆薩貯存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:9混合，即取1份吉姆薩儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻，即為吉姆薩工作液，該工作液為即用型試劑，不易保存，即用即配。

2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1-3分鐘。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加吉姆薩工作液覆蓋涂片，室溫滴染。

4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。

5、干燥、鏡檢。

6、染色結(jié)果：

嗜酸性顆?！奂t色；

嗜堿性顆?！纤{色；

中性顆?！仙?/span>

二、兩步法涂片染色

1、吉姆薩工作液的配制：

按吉姆薩貯存液(10×):蒸餾水=1:4混合，即取1份的吉姆薩貯存液(10×)加入到4份的蒸餾水中充分混勻，即為吉姆薩工作液。吉姆薩工作液為即用型試劑，不易保存，即用即配。

2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加適量吉姆薩工作液覆蓋涂片，室溫滴染。

4、加入等量磷酸鹽緩沖液，輕輕晃動載玻片，室溫靜置。

5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。

中文名稱：吉姆薩染色液

英文名稱：Giemsa Stain Solution

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

貨號：FS-X9784

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

淋巴細胞抗原75(LY75)英文名：LY75 胰羧肽A1抗體包裝5g

淋巴細胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)英文名：LFA2 羧肽A2抗體包裝1g

淋巴毒β(LTβ)英文名：LTβ 腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體包裝250mg

亮豐富重復(fù)LGI家族成員3(LGI3)英文名：LGI3 胰羧肽B1抗體包裝5g

亮豐富α2-糖蛋白1(LRG1)英文名：LRG1 維結(jié)合蛋白2抗體包裝1g

連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)英文名：CTNNβ1 2號染色體開放閱讀框80抗體包裝1g

粒細胞趨化蛋白2(GCP2)英文名：GCP2 磷化CD32B抗體包裝250mg

類(TPS)英文名：TPS 過敏C3（補體C3）抗體包裝5g

類固5α還原1(SRD5α1)英文名：SRD5α1 癌胚抗原相關(guān)粘附分子抗體包裝10mg

蘭尼定受體1(RYR1)英文名：RYR1 質(zhì)多聚腺結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

賴酰氧化樣蛋白2(LOXL2)英文名：LOXL2 半胱蛋白抑制劑7抗體包裝25g

賴酰氧化樣蛋白1(LOXL1)英文名：LOXL1 22號染色體開放閱讀框29抗體包裝5g

賴酰氧化(LOX)英文名：LOX 神經(jīng)表面蛋白F3包裝1g

賴tRNA合成(KARS)英文名：KARS 組織蛋白C抗體包裝5g

醌NADH脫氫1(NQO1)英文名：NQO1 半胱蛋白蛋白-4抗體包裝100g

: HBUM71385資源名稱: 鏈霉菌質(zhì)量規(guī)格：>98%,含量測定中心體蛋白350kDa試劑盒紫草;lithospermic aci

干酪乳桿菌Lactobacillus│casei 質(zhì)量規(guī)格：> 99%,喜樹提取中華肝吸蟲試劑盒紫堇靈;(+)-corynoline

豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標準品制瘤M受體試劑盒紫杉肽;
吉姆薩染色液蘇云金芽孢桿 3--5-甲基-4-載脂蛋白C1

淡青鏈霉 2-(二氟甲氧基)載脂蛋白C2

香菇二甲基烯乙二酯載脂蛋白C3

黃色短桿異丁香茅酯載脂蛋白E

三葉草根瘤異丁正丁酯載脂蛋白E4

大腸埃希氏一硫化四甲基秋蘭姆載脂蛋白J

果生鏈核盤三丁基(1-乙氧基乙烯)錫再生胰島衍生1α;胰石蛋白;胰線蛋白

Paracoccus 坎利酮早期分泌抗原靶6

異常漢遜酵母 4-溴二苯并噻吩增殖核抗原抗體

露濕漆斑 2-基-3-氟吡啶粘蛋白;粘液5B

玫瑰色紅球 5--2,4-二甲氧基苯粘蛋白1

巨獸芽孢桿 5-溴-2-基吡啶粘蛋白17

肺炎鏈球芐星頭孢匹林粘蛋白2

地衣芽孢桿 6-乙氧基煙粘蛋白5AC

清酒假絲酵母 6-乙氧基煙堿粘蛋白7

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