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Hoechst33342染色液(含封片劑)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:30:58瀏覽次數(shù):165次

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貨號 FS-X9883
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Integrin Beta 3/CD61 整合β3抗體咪唑 99.5%,用于熒光分析
JAK1 蛋白質酪氨激JAK-1抗體咪唑 99.5%,分子生物學級
Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 化蛋白質酪氨激JAK-1抗體咪唑

產(chǎn)品介紹:

用途:

細胞周期分析、活細胞染色等

注意事項:

Hoechst33342是一種熒光染料,可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測??芍苯佑糜诠潭毎蚪M織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。

儲存條件:-20℃,避光,6個月

中文名稱:Hoechst33342染色液(含封片劑)

英文名稱:Hoechst33342 Staining Solution

產(chǎn)品規(guī)格:10ml

貨號:FS-X9883

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

藤黃短小桿菌鹽轉運三磷腺抗體Human MAN1A2 小鼠

蘇云金芽胞桿菌櫪木亞種精tRNA的蛋白轉移1抗體Human MAP4K4 小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒

南方鹽單胞菌共濟失調蛋白7樣1抗體Human MAP7 小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒

疣孢鏈霉菌孤獨癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關蛋白1)Human MAN2B2 小鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒

聚生殼菌脊髓小腦共濟失調2型蛋白抗體Human MANBAL 小鼠組織蛋白去乙酰化2(Hdac2/Yy1bp)免疫試劑盒

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水稻節(jié)桿菌載脂蛋白1抗體Human MANEA 小鼠組蛋白去乙?;?(HDAC4)免疫試劑盒

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挪威假絲酵母精1抗體Human MALT1 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒

平滑假絲酵母腺激結構域蛋白1抗體Human MAML1(Mastermind-like protein 1) 小鼠組(HIS)免疫試劑盒

盤長孢狀盤孢三磷腺結合盒轉運蛋白7抗體Human MAML3 小鼠總蛋白C(TPC)免疫試劑盒

中國臺灣假黃單胞菌磷化鈉ATPα1多肽抗體Human MAN2B2 小鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒

小孢鏈霉菌Na+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體Human MAN1A2 小鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒

磚紅鐮刀菌肌動蛋白樣蛋白6B抗體Human MANBAL 小鼠轉化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒

大腸埃希菌脊髓小腦共濟失調蛋白7抗體Human MANEA 小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒

彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質量規(guī)格:>98%,BR表皮活化肽因子試劑盒鹽伊立替康

云芝Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質量規(guī)格:>99%,BR表皮生長因子樣結構域蛋白7試劑盒愈創(chuàng)木

溶血不動桿菌基因型4Acinetobacter│haemolyticus/genospecies 4 質量規(guī)格:AR,≥99%表皮生長因子受體2試劑盒氧化石蒜堿
Hoechst33342染色液(含封片劑)灰樹花 2-氨基-5--3-吡啶,95%腎前體

根瘤 1-Boc-1-RNA結合基元蛋白8A

澳大利亞糖絲 2-氟-5-苯半胱氨酰白三烯受體

根瘤 吡啶并[3,4-D]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮尿皮質

釀酒酵母 2,4,6-三氟類缺陷病抗體1+2

釀酒酵母 4--2-高密度脂蛋白2b

維羅納假單胞 6-氟-2-吡啶高密度脂蛋白2

平臍蠕孢 2-鹽乙脒鹽鹽高密度脂蛋白3

金黃色葡萄球 N,N-二甲基基硅抗甲流H5(H5N1)血凝蛋白IgG抗體

玻利維亞鹽單胞 2-氧代環(huán)戊基乙乙酯抗甲流H5(H5N1)血凝蛋白IgM抗體

草生鏈霉 1,4-二氮雜-5-環(huán)庚酮鹽鹽Flag標簽

金頂側耳、榆黃磨、金頂磨 1-芐基-4-酮鹽鹽角蛋白19片段

葡萄座腔 Cbz-O-芐基-L-絲生長因子

適宜劍 4-溴-2,5-二氟苯磺酰糖原合成激3β

雞樅(雞) 雷瑣太爾促甲狀腺受體

 


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