碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9887

中文名稱：碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：10ml

貨號：FS-X9887

產(chǎn)品介紹:

用途：

流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等，主要用于DNA染色。

注意事項：

Propidium Iodide簡稱PI，又稱碘化丙啶，分子量為668.40，對人體有刺激性，本試劑中含Rnase A，RNase濃度200ug/ml。

儲存條件：-20℃，避光，6個月

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

黑根霉銜接蛋白α-Adaptin抗體Human LYRM7 小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgM)免疫試劑盒

粘性絲孢酵母凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）Human LYPLAL1 小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgG)免疫試劑盒

黑曲霉凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）Human LYAR 小鼠印度猬因子(IHH)免疫試劑盒

冷溫木拉克酵母三磷腺結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體Human LY6K 小鼠2,3-雙加氧1(IDO1)免疫試劑盒

長枝木霉載脂蛋白E抗體Human LYN 小鼠音猬因子N端(Shh-N)免疫試劑盒

雞傷門氏菌淀粉樣肽前體蛋白抗體Human LYG1 小鼠抑制B(INH-B)免疫試劑盒

彎孢菌水通道蛋白-2抗體Human LY96 小鼠抑制A(INH-A)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌血管緊張原抗體Human LYPLAL1 小鼠抑瘤M(OSM)免疫試劑盒

大腸埃希氏桿菌雄激受體抗體Human LYRM7 小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)免疫試劑盒

茯苓死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱蛋白激活抑制劑)Human LYPLA1 小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒

熒光假單胞菌軸蛋白1抗體Human LUC7L 小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌自噬相關(guān)蛋白9B抗體Human LUC7L2 小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)免疫試劑盒

放線纖維菌自噬相關(guān)蛋白12抗體Human LSM8 小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)免疫試劑盒

藍(lán)色犁頭霉自噬相關(guān)蛋白13抗體Human LSM5 小鼠乙酰免疫試劑盒

休哈塔假絲酵母自噬相關(guān)蛋白3抗體Human LSP1 小鼠乙酰酯(AChE)免疫試劑盒

連香樹迪茲氏菌整合樣金屬蛋白與凝血4型抗體Human LSM7 小鼠乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒

小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分吡哆/吡哆維生B6磷試劑盒乙酰黃芪皂I

天津棒桿菌Corynebacterium│tianjin 質(zhì)量規(guī)格：BR吡哆/吡哆維生B6激試劑盒鹽去氫駱駝蓬堿

pCas(#62225)pCas(#62225) 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR鼻病試劑盒右旋四氫巴馬汀
碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)北方蜜環(huán) 美拉諾坦半胱蛋白9

釀酒酵母 17-AAG載脂蛋白E2

鏈霉 3--4-氟苯甲糖類抗原

白地霉 Bovine adrenal medulla dodecapeptide血小板衍生生長因子AA

天藍(lán)褐鏈霉 4-氟-3-硝基芐真核翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1

釀酒酵母 2-甲氧基-3-連接橋粒斑珠蛋白

大腸埃希 Regorafenib (BAY 73-4506)抗鏈球溶血0

膠孢 [Arg8]-Vasotocin acetate saltF肌動蛋白

pET-23a NVP-AUY922Talin-1

馬賽 2-甲氧基-3-硝基吡啶δ-維生E

堅強芽孢桿雙(2-甲氧乙基)氨基三氟化硫（BAST）γ-維生E

擬雷氏日歸殼 1H-1,2,3-三氮唑-4-鹽鹽α-維生E

陰溝腸桿 3,5-二-2-硝苯β-胡蘿卜

腸膜明串珠 -氟-4-甲基-5-硝苯黃體生成釋放

圓弧青霉 2--3-氟-4-羥基吡啶溶體相關(guān)膜蛋白2抗體

国产精品成人网站,亚洲欧美精品在线,色一情一乱一伦,又大又紧又粉嫩18P少妇

碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase) 返回列表頁

儀表網(wǎng)

會員登錄

收藏該商鋪

提示