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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TPKB人蛋白激酶BELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | PKB人蛋白激酶BELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱(chēng) | Human protein kinase B, PKB Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63952 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
鴨細(xì)病核快速診斷試劑盒 PCR法AntiNFH 0.1ml
Nunc 免疫管(Immuno Tube)AntiNFKBp65 0.1ml
貂源性成分快速鑒別試劑盒 實(shí)時(shí)熒光PCR法AntiNFL 0.1ml
狐貍源性成分快速鑒別試劑盒 實(shí)時(shí)熒光PCR法AntiNFM 0.1ml
兔源性成分快速鑒別試劑盒 實(shí)時(shí)熒光PCR法AntiNFκBp50 0.1ml
鵝源性成分快速鑒別試劑盒 實(shí)時(shí)熒光PCR法AntiNGFR/p75/CD271 0.1ml
鴨源性成分快速鑒別試劑盒 實(shí)時(shí)熒光PCR法AntiNGFβ 0.1ml
Estradiol, E2 Elisa Kit蝶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Estradiol, E2 Elisa Kit拉呋替丁Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Dehydroepiandrosterone sulfate, DHEAS Elisa Kit 拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Dehydroepiandrosterone sulfate, DHEAS Elisa Kit 可索侖/維生素E聚二琥珀酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Testoterone, T Elisa Kit甲那明Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Testoterone, T Elisa Kit羅沙替丁醋酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Free Testoterone, FTESTO Elisa Kit培美曲塞Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Free Testoterone, FTESTO Elisa Kit培美曲塞(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Androstenedione, ASD Elisa Kit周效磺(磺多辛)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Androstenedione, ASD Elisa Kit周效磺(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Estriol, E3 Elisa Kit青G鈉Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Estriol, E3 Elisa Kit青G鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
17Hydroxyprogesterone, 17OHP Elisa Kit米格列奈鈣Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
17Hydroxyprogesterone, 17OHP Elisa Kit米格列奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Triiodothyronine, T3 Elisa Kit基嘧 /6正基2代尿嘧Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Triiodothyronine, T3 Elisa Kit米龍醋酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
血板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
腺病3(ADV3)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human ADV3 IgG ELISA Kit
丙二(MDA)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
RatMotilin,MTL酶聯(lián)免疫試劑盒胃動(dòng)素(MTL)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgM酶聯(lián)免疫試劑盒丙型肝炎IgM(HCV-IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanL-SelectinELISAKitL選擇素(L-Selectin/CD62L)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
β神經(jīng)生長(zhǎng)因子(β-NGF)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
核因子κB(NF-κB)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Nuclear factor-kappa B,NF-κB Elisa Kit
沙眼衣原體抗原(CT)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: CT ELISA Kit
PorcinelisteriolysinO,LLO酶聯(lián)免疫試劑盒單核增多性李斯特菌素O((LLO)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanAlpha-fetoprotein,AFP酶聯(lián)免疫試劑盒種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanAquaporin0,AQP-0ELISAKit水通道蛋白0(AQP-0)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
PKB人蛋白激酶BELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理CD34/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD34抗體IgG磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體8-溴腺苷Mouse PDPN (Podoplanin) ELISA Kit
CD44/FITC 熒光素標(biāo)記CD44抗體IgG磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑(MMTD)Mouse NFκB2 (Nuclear Factor Kappa B2) ELISA Kit
CD43/SPN/FITC 熒光素標(biāo)記CD43抗體IgG磷化B-Raf抗體2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑(MMTD)Mouse BMG/β2-MG (Beta-2-Microglobulin) ELISA Kit
CD44/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD44抗體IgG磷化B-Raf抗體2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑(MMTD)Mouse NPHN (Nephrin) ELISA Kit
CD44v4 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠CD44V4抗體IgG磷化Bcl-xL蛋白抗體羥胺-O-磺Mouse AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit
CD44v5 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠CD44V5抗體IgG高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體羥胺-O-磺Mouse FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit
CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD44抗體IgGB遷移基因4抗體羥胺-O-磺Mouse FGF23 (Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit
CD44v7 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠CD44V7抗體IgGBCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷Mouse FGFR1 (Fibroblast Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
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