當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 蘇丹黑B染色液
貨號(hào) | FS-X10088 |
---|
產(chǎn)品介紹:
用途: 脂肪、磷脂染色,又稱SBB染色液。 注意事項(xiàng): 主要由蘇丹黑B,核固紅染液組成。中性脂肪呈黑色,磷脂呈灰黑色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
中文名稱:蘇丹黑B染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml|2×100ml
貨號(hào):FS-X10088
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
綠孢環(huán)柄菇雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體Human LARP7(La-related protein 7) 人補(bǔ)體7(C7)免疫試劑盒
耐久腸球菌雙特異性磷22抗體Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)免疫試劑盒
擬青霉Erdj5/DNAJC10蛋白抗體Human COL7A1(Collagen alpha-1(VII) chain) 人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)免疫試劑盒
潮濕乳菇腫瘤調(diào)亡/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) 人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)免疫試劑盒
樟疫霉跨膜TMIGD1蛋白抗體Human BDG(beta-D-glucan) 人補(bǔ)體1q(C1q)免疫試劑盒
黑曲霉軸絲中鏈動(dòng)力蛋白抗體Human TAT (Tyrosine aminotransferase) 人玻連蛋白(VTN)免疫試劑盒
禾谷鐮孢*軸絲動(dòng)力蛋白7抗體Human SKI (Ski oncogene) 人波形蛋白(VIM)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌環(huán)指蛋白19抗體Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) 人并殖吸蟲抗體(IgM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌δ-連環(huán)蛋白抗體Human WDTC1 (WD and tetratricopeptide repeats protein 1) 人并殖吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒
黃桿菌屬防御β2抗體Human CHIT1(Chitotriosidase-1) 人型肝炎病(HCV)核心抗原(HCV core Ag)免疫試劑盒
青霉磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體Human UXS1 (UDP-glucuronic acid decarboxylase 1) 人型肝炎IgM(HCV-IgM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌雙氧化1/甲狀腺氧化1抗體Human UFL1 (E3 UFM1-protein ligase 1) 人型肝炎IgG(HCV-IgG)免疫試劑盒
綠僵菌雙氧化2/甲狀腺氧化2抗體Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) 人酰羧化β多肽(PCCB)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母雙氧化成熟因子抗體Human TAT (Tyrosine aminotransferase) 人烯(ACR)免疫試劑盒
爪哇毛霉胞質(zhì)分裂專一蛋白7抗體Human WRAP73 (WD repeat-containing protein WRAP73) 人脫氫E1(PDH E1)免疫試劑盒
嗜腐爛居真菌細(xì)菌DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體Human URGCP (Up-regulator of cell proliferation) 人激R型同工(R-PK)免疫試劑盒
日本根霉Rhizopus│japonicus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品大豆皂Ba
: M1資源名稱: 傷門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品(for titrimetry),≥99.5%(HPLC)賽門I
泡囊短波單胞菌Brevundimonas│vesicularis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%甜茶
蘇丹黑B染色液芽孢桿 2-雙環(huán)已基膦-2 ',6'-二異氧基聯(lián)苯亞硝還原
臭曲霉 庚基-β-D-吡喃葡萄糖甘脫羧
茄鐮孢 2--3-吡啶絲乙轉(zhuǎn)氨
交鏈孢屬 3,5-雙(三氟甲基)苯甲酰甘甜菜堿
假絲酵母屬 4、4'-二氨基苯酰替苯嘔吐
大豆慢生根瘤 (S)-2,5-二氫-3,6-二甲氧基-2-異基吡乙酰乳合成
雙孢蘑菇 1-乙炔基-1-環(huán)己還原態(tài)煙酰腺二核磷
空腸彎曲桿 L-羥鈷氧化態(tài)煙酰腺二核磷
煙色毛霉 N,N'-雙芴甲氧羰基-L-賴GDP-L-半乳糖磷
Gillisia limnaea 4,5-二氟-2-GDP-D-甘露糖焦磷化
大腸埃希 硫酰幾丁質(zhì)
柳巴克利酵母 水合肼 一水合物谷脫羧
德爾布有孢酵母 高鈉 一水合物γ-氨基丁轉(zhuǎn)氨
綠針假單胞 化鈰(III)葡萄糖焦磷化
黃多孔 鎢鎘淀粉分支
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。