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木質(zhì)素染色液(甲基紅法)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 16:35:42瀏覽次數(shù):127次

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貨號 FS-X10187
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E-Selectin/FITC 熒光標記E選擇抗體IgG解喹
ET-1/FITC 熒光標記內(nèi)皮-1抗體IgG戊二二酯 98%
ET-1/FITC 熒光標記內(nèi)皮-1抗體IgG己二二酯 AR,≥99%
ET-1/FITC 熒光標記內(nèi)皮-1抗體IgG馬來二丁酯 97%
ET-1/HR

中文名稱:木質(zhì)素染色液(甲基紅法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:50ml

貨號:FS-X10187

產(chǎn)品介紹:

用途:

木質(zhì)化細胞壁染色,呈現(xiàn)黃色反應(yīng)。

儲存條件:室溫,避光,6個月

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

根瘤菌谷受體紅藻離子5抗體Human IDH1(IsocitRate dehydrogenase [NADP] cytoplasmic) 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫試劑盒

麥根腐平臍孺孢棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ抗體Human UBA2 大鼠血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒

大麗花輪枝孢G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human UBA5 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒

布魯氏菌病(+)陽性血清G基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體Human UBA6 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒

孟氏假單胞菌G蛋白α抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) 大鼠血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒

香菇G蛋白β樣蛋白抗體Human TXNDC17 大鼠血栓合成(TXAS)免疫試劑盒

莫氏克羅諾桿菌通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體Human TULP1 大鼠血栓B2(TXB2)免疫試劑盒

醋化醋桿菌磷化gp130抗體Human TUFT1 大鼠血栓A2(TXA2)免疫試劑盒

戴爾根霉糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體Human UBA5 大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒

紅霉鏈霉菌高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒

釀酒酵母胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體Human UBA6 大鼠血清受體2A/5-羥色受體2A(5-HT-2A)免疫試劑盒

土曲霉糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體Human UBAC2 大鼠血清(5-羥色)-N-乙?;D(zhuǎn)移(AANAT)免疫試劑盒

短桿狀馬賽菌促代謝型谷受體2抗體Human UBASH3A 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒

香菇G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human TXNDC5(Thioredoxin domain-containing protein 5) 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒

巴氏醋桿菌β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉(zhuǎn)移6抗體Human UBAP1 大鼠血紅氧合2(HO-2)免疫試劑盒

明膠樣鏈霉菌?;?/span>/β-基乙磺抗體Human TXNDC4 大鼠血紅氧合1(HO-1)免疫試劑盒

云南紅球菌Rhodococcus│yunnanensis 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱表小檗堿

: AS2.614資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用地榆皂II

吸鏈霉菌Streptomyces│hygroscopicus 質(zhì)量規(guī)格:3-5mm,球形地榆皂I
木質(zhì)素染色液(甲基紅法)棱蓋多孔 4--2,8-雙(三氟甲基)喹啉綠色熒光蛋白

梨黑斑鏈格孢 3--4-甲美金剛

樟疫霉 2',4'-二甲氧基苯乙酮錳超氧化物歧化

貝倫格勒座腔梨?;?/span> N-((S)乙氧羰基-1-丁基)-(S)-糜蛋白

釀酒酵母 4-(4-氨基苯基)啉-3-酮球蛋白A

Phoma medicaginis var. medicaginis 基環(huán)己基環(huán)己球蛋白D

松乳菇 (S)-(-)-1-(3-甲氧苯基)乙球蛋白E

黃蓋蜜環(huán) (S)-3-二甲基氨基-3-苯球蛋白G

粉狀畢赤氏酵母 O-叔丁基-L-蘇球蛋白G1

黑絡(luò)丸 8-氨基萘磺球蛋白G2

釀酒酵母 3-溴鄰苯二甲酐球蛋白G2a

枯草芽孢桿 5-溴-2-三氟球蛋白M

平臍蠕孢 N-磺丁基吡啶硫氫鹽繆勒管抑制物質(zhì);抗繆勒管

根瘤 3-吡唑-4-甲乙酯膜聯(lián)蛋白-A2

枯草芽孢桿 肉桂,順式+反式末端補體復(fù)合物

 


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