當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞組織染色>> 木質(zhì)素染色液(甲基紅法)
貨號 | FS-X10187 |
---|
中文名稱:木質(zhì)素染色液(甲基紅法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50ml
貨號:FS-X10187
產(chǎn)品介紹:
用途: 木質(zhì)化細胞壁染色,呈現(xiàn)黃色反應(yīng)。 儲存條件:室溫,避光,6個月 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
根瘤菌谷受體紅藻離子5抗體Human IDH1(IsocitRate dehydrogenase [NADP] cytoplasmic) 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫試劑盒
麥根腐平臍孺孢棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ抗體Human UBA2 大鼠血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒
大麗花輪枝孢G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human UBA5 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒
布魯氏菌病(+)陽性血清G基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體Human UBA6 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌G蛋白α抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) 大鼠血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
香菇G蛋白β樣蛋白抗體Human TXNDC17 大鼠血栓合成(TXAS)免疫試劑盒
莫氏克羅諾桿菌通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體Human TULP1 大鼠血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
醋化醋桿菌磷化gp130抗體Human TUFT1 大鼠血栓A2(TXA2)免疫試劑盒
戴爾根霉糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體Human UBA5 大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒
紅霉鏈霉菌高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒
釀酒酵母胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體Human UBA6 大鼠血清受體2A/5-羥色受體2A(5-HT-2A)免疫試劑盒
土曲霉糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體Human UBAC2 大鼠血清(5-羥色)-N-乙?;D(zhuǎn)移(AANAT)免疫試劑盒
短桿狀馬賽菌促代謝型谷受體2抗體Human UBASH3A 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
香菇G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human TXNDC5(Thioredoxin domain-containing protein 5) 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉(zhuǎn)移6抗體Human UBAP1 大鼠血紅氧合2(HO-2)免疫試劑盒
明膠樣鏈霉菌?;?/span>/β-基乙磺抗體Human TXNDC4 大鼠血紅氧合1(HO-1)免疫試劑盒
云南紅球菌Rhodococcus│yunnanensis 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱表小檗堿
: AS2.614資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用地榆皂II
吸鏈霉菌Streptomyces│hygroscopicus 質(zhì)量規(guī)格:3-5mm,球形地榆皂I
木質(zhì)素染色液(甲基紅法)棱蓋多孔 4--2,8-雙(三氟甲基)喹啉綠色熒光蛋白
梨黑斑鏈格孢 3--4-甲美金剛
樟疫霉 2',4'-二甲氧基苯乙酮錳超氧化物歧化
貝倫格勒座腔梨?;?/span> N-((S)乙氧羰基-1-丁基)-(S)-糜蛋白
釀酒酵母 4-(4-氨基苯基)啉-3-酮球蛋白A
Phoma medicaginis var. medicaginis 基環(huán)己基環(huán)己球蛋白D
松乳菇 (S)-(-)-1-(3-甲氧苯基)乙球蛋白E
黃蓋蜜環(huán) (S)-3-二甲基氨基-3-苯球蛋白G
粉狀畢赤氏酵母 O-叔丁基-L-蘇球蛋白G1
黑絡(luò)丸 8-氨基萘磺球蛋白G2
釀酒酵母 3-溴鄰苯二甲酐球蛋白G2a
枯草芽孢桿 5-溴-2-三氟球蛋白M
平臍蠕孢 N-磺丁基吡啶硫氫鹽繆勒管抑制物質(zhì);抗繆勒管
根瘤 3-吡唑-4-甲乙酯膜聯(lián)蛋白-A2
枯草芽孢桿 肉桂,順式+反式末端補體復(fù)合物
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。