ACO順烏頭酸酶檢測試劑盒微量法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63481

商品介紹：

測定意義

順烏頭酸酶（aconitase），三羧酸循環(huán)中的酶，催化檸檬酸轉(zhuǎn)變?yōu)楫悪幟仕?。檸檬酸本身不易氧化，在順烏頭酸酶作用下，通過脫水與加水反應(yīng)，使羥基由β碳原子轉(zhuǎn)移到α碳原子上，生成易于脫氫氧化的異檸檬酸，為進(jìn)一步的氧化脫羧反應(yīng)作準(zhǔn)備。

測定原理

ACO催化檸檬酸轉(zhuǎn)化成異檸檬酸，異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH，導(dǎo)致340nm處光吸收上升。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：ACO順烏頭酸酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63481
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操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

前列腺E受體2(EP2)檢測試劑盒粗柄羊肚Rabbit GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit

甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測試劑盒嗜冷海桿Rabbit AP (Aprotinin) ELISA Kit

甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測試劑盒假諾卡氏Rabbit GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit

甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測試劑盒釀酒酵母Rabbit TACR3 (Tachykinin Receptor 3) ELISA Kit

酮脫氫磷(PDP)檢測試劑盒蒼白桿屬Rabbit NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit

酮脫氫磷(PDP)檢測試劑盒茄鏈格孢Rabbit GDF1 (Growth Differentiation Factor 1) ELISA Kit

胱天蛋白8(P8)檢測試劑盒動物雙歧桿Rabbit NT-ProBNP (N-Terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit

胱天蛋白8(P8)檢測試劑盒彩色豆馬勃Rabbit SBEM (Small Breast Epithelial Mucin) ELISA Kit

蛋白激活受體2(PAR2)檢測試劑盒多粘類芽胞桿Rabbit I-TAC (Interferon Inducible T-cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit

蛋白激活受體2(PAR2)檢測試劑盒江西諾卡氏Rabbit CALLA (Common Acute Lymphocytic Leukaemia Antigen) ELISA Kit

高鐵血紅蛋白還原(MHBR)檢測試劑盒愛媛類芽孢桿Rabbit FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit

補(bǔ)體成分3(C3)檢測試劑盒蒼白鹽八疊球Rabbit GPC2 (Glypican 2) ELISA Kit

補(bǔ)體成分3(C3)檢測試劑盒枯草芽孢桿Rabbit CLEC2C (C-Type Lectin Domain Family 2 Member C) ELISA Kit

補(bǔ)體成分3(C3)檢測試劑盒雜色曲霉Rabbit PLSCR2 (Phospholipid Scramblase 2) ELISA Kit

嗜中性粒胞漿因子2(NCF2)檢測試劑盒白僵Rabbit Tgtp (T-cell Specific Gtpase) ELISA Kit
ACO順烏頭酸酶檢測試劑盒微量法溴百里香藍(lán) ACS, Dye content 95 %5-基-3-甲基異噻唑鹽鹽 97%Anti-HIV gp120/FITC 熒光標(biāo)記艾滋病病抗體IgG

溴百里香藍(lán)指示劑2-乙?；⑧绶?98%Anti-HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC 熒光標(biāo)記艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體IgG

溴甲紫 IND2-基-4-并噻唑 98%Anti-HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC 熒光標(biāo)記艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體IgG

溴甲紫 98%N-叔丁基-十氫異喹啉-3(S)-甲酰 97%Anti-HisX6/6His/His tag(CT) /FITC 熒光標(biāo)記聚組抗體/抗His tag（C端）標(biāo)簽抗體IgG

反式 standard for GC4-溴甲基喹啉-2-酮 97%Anti-HisX6/6His/His tag(CT)/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記聚組抗體/抗His tag標(biāo)簽抗體（C端）IgG

溴紅 AR,80%4-溴-2,6-二氟甲 98%Anti-HLA-DR/FITC 熒光標(biāo)記HLA-DR抗原抗體IgG

考馬斯亮藍(lán)R250 AR(R)-(+)-2-溴-alpha-甲 98%Anti-HLA-E/FITC 熒光標(biāo)記人類白抗原EIgG

溴甲綠鈉 AR3-溴喹啉 98%Anti-HLA-G/FITC 熒光標(biāo)記人類白抗原G/組織相容性白抗原G抗體IgG