當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TGSK人糖原合成酶激酶ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | GSK人糖原合成酶激酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human glycogen synthase kinase, GSK Elisa Kit |
貨號 | FS-H63938 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
ligase DTX3L) ELISA Kit
丁香假尾孢菌拉丁屬名: Lactobacillus paracasei小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒Human E2F4 ELISA Kit
彎頸霉屬拉丁屬名: Trametes hirsuta小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒Human EDAR ELISA Kit
辣椒疫霉拉丁屬名: Bacillus subtilis小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒Human EDC3 ELISA Kit
奧氏蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒Human EDC4 ELISA Kit
紅緣擬層孔菌拉丁屬名: Rhizopus oryzae小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒Human E2F7 ELISA Kit
尖鐮孢 黃瓜?;屠倜? Actinomadura madurae小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒Human E2F8 ELISA Kit
猴頭菇拉丁屬名: Syncephalastrum racemosum小鼠粒細(xì)胞集落激因子(G-CSF)ELISA試劑盒Human DNAJC2/MPP11 ELISA Kit
天麻蜜環(huán)菌(京-234)拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒Human DAPK1 ELISA Kit
茯苓578注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 Human DOCK180 ELISA Kit
黑木耳(東A-3)拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒Human DPPA4 ELISA Kit
散囊菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒Human DCBLD2 ELISA Kit
dium citra dihydra 檸檬三鈉二水合物英文名稱: Trisodium citra dihydra: 6132-04-3單位: 瓶其它:
GSK人糖原合成酶激酶ELISA試劑盒實驗原理cath-L/CL /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶L抗體IgG膜粘連蛋白6抗體TRAM-34Mouse TGF-α (Transforming Growth Factor α) ELISA Kit
Cathepsin B/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗組織蛋白酶B抗體IgGβ淀樣肽(25-35)抗體L-色氨Mouse TGFb2 (Transforming Growth Factor Beta 2) ELISA Kit
Cav-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗凹蛋白抗體IgG血管緊張素I抗體L-色氨Mouse TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit
Caveolin-3/FITC 熒光素標(biāo)記質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體IgG腎上腺髓質(zhì)素抗體(N端20肽)吡Mouse TGF-β4 (Transforming Growth Factor β4) ELISA Kit
CACH2/CaV1.2/FITC 熒光素標(biāo)記L型鈣通道蛋白抗體IgGADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體吡Mouse TG (Transglutaminase) ELISA Kit
CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgG精氨加壓素受體2抗體吡Mouse TMED1 (Transmembrane Emp24 Domain Containing Protein 1) ELISA Kit
CBFA1/RUNX2/FITC 熒光素標(biāo)記成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG凋亡相關(guān)斑點樣蛋白ASC抗體3-溴苯磺酰Mouse TNPO1 (Transportin 1) ELISA Kit
CBL2 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠原癌蛋白CBL2抗體IgG絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體3-溴苯磺酰Mouse TTR (Transthyretin) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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