產品屬于：

產品名稱：大鼠垂體瘤細胞    

產品英文：GH3

貨號：FS-01X9711

細胞培養(yǎng)條件：F12K+2.5%FBS+15%HS（馬血清）+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁+懸浮(少量)

產品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫   

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cytokeratin 18，CK-18 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒英文名稱：Human soluble transferrin receptor，sTfR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒英文名稱：Human Metallothionein，MT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人凋亡蛋白激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒 英文名稱：Human apoptosis protease activating factor-1，Apaf-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人中期因子(MK)ELISA試劑盒英文名稱：Human Midkine，MK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒英文名稱：Human B-cell leukemia/lymphoma 2，Bcl-2 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒英文名稱：Human hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒英文名稱：Human transferrin receptor，TFR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人P53(P53)ELISA試劑盒英文名稱：Human p53/tumor protein， p53/TP53 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人內皮抑(ES)ELISA試劑盒英文名稱：Human Endostatin，ES ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒英文名稱：Human ferritin，F(xiàn)E ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人基質金屬蛋白組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒英文名稱：Human tissue inhibitor of metal protease 1，TIMP-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒英文名稱：Human myelin basic protein autoantibody，MBP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人組織多抗原(TPA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Tissue Polypeptide Antigen，TPA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人肺癌標志物ELISA試劑盒英文名稱：human lung cancer Marker ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人胃癌標志物ELISA試劑盒英文名稱：human gastric carcinoma Marker ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人胰腺癌標志物CA242ELISA試劑盒英文名稱：Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒英文名稱：Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠垂體瘤細胞TMED4  跨膜蛋白TMED4抗體規(guī)格: 0.2ml

NRIP  雄受體復合物相關蛋白抗體（核受體相互作用蛋白）規(guī)格: 0.2ml

PCMT1  天甲基轉移PCMT抗體規(guī)格: 0.2ml

ERRB2/Estrogen Related Receptor beta  雌相關受體β抗體規(guī)格: 0.2ml

ESRRG/Estrogen Related Receptor gamma  雌受體相關蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

RDH11  脫氫11抗體（丙型肝炎病毒核心蛋白）規(guī)格: 0.2ml

ROR1/ROR alpha  維甲相關孤兒受體α抗體規(guī)格: 0.2ml

RORB  維甲相關孤兒受體β抗體規(guī)格: 0.2ml