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貨號 | FS-X9988 |
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中文名稱:甲酸脫鈣液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
貨號:FS-X9988
產(chǎn)品介紹:
用途: 慢性脫鈣液,主要用于小塊組織,脫鈣同時可以對組織固定 注意事項: 主要由甲酸、福爾馬林組成,推薦用于小塊組織和牙齒的脫鈣,不推薦用于常規(guī)標本的脫鈣。 儲存條件:室溫,12個月 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母卷曲螺旋結構域蛋白40抗體Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) 人血紅蛋白C(HbC)免疫試劑盒
白色短波單胞菌卷曲螺旋結構域蛋白114抗體Human ProSAAS/PCSK1N(granin-like neuroendocrine peptide) 人血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒
挪威畢赤酵母卷曲螺旋結構域蛋白39抗體Human GGH(Gamma-glutamyl hydrolase) 人血管抑/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)免疫試劑盒
華根霉卷曲螺旋結構域蛋白34抗體Human P2RY2(P2Y purinoceptor 2) 人血管性血友病因子裂解(ADAMTS-13/vWF-cp)免疫試劑盒
黃曲霉卷曲螺旋結構域蛋白75抗體Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) 人血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒
香菇卷曲螺旋結構域蛋白65抗體Human OT(Oxytocin) 人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試劑盒
釀酒酵母卷曲螺旋結構域蛋白157抗體Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) 人血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)免疫試劑盒
松針散斑殼卷曲螺旋結構域蛋白90B抗體Human TXB2(Thromboxane B2) 人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體Human KYN(Kynurenine) 人血管生成4(ANG-4)免疫試劑盒
深紅酵母卷曲螺旋結構域蛋白104抗體Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) 人血管生成2(ANG-2)免疫試劑盒
微白類諾卡氏菌卷曲螺旋結構域蛋白12抗體Human TXB2(Thromboxane B2) 人血管生成1(ANG-1)免疫試劑盒
凱斯特鞘單胞菌卷曲螺旋結構域蛋白67抗體Human OT(Oxytocin) 人血管生長(ANG)免疫試劑盒
尖角凸臍蠕孢卷曲螺旋結構域蛋白129抗體Human KYN(Kynurenine) 人血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)免疫試劑盒
薔薇生鏈格孢卷曲螺旋結構域蛋白107抗體Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) 人血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒
假單胞菌屬卷曲螺旋結構域蛋白18抗體Human Acetylated p53(Acetylated p53) 人血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒
Microterricola viridarii卷曲螺旋結構域蛋白56抗體Human Cleaved P9(Cleaved Caspase-9) 人血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒
猴頭菌(猴頭蘑、刺猬菌)Hericium│erinaceus 質量規(guī)格:>98%,BRE鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白試劑盒槲皮-3-O-β-D-葡糖糖-7-O-
: 195-75資源名稱: 非O1群霍亂弧菌 質量規(guī)格:>99%,BRES1蛋白同系物,線粒體試劑盒胡薄荷
解脂假絲酵母Candida│lipolytica 質量規(guī)格:>98%,BREphrin-B2試劑盒紅花八角
甲酸脫鈣液輪紋大莖點 西洛多辛α淀粉1
云芝栓孔(變色栓) Iniparib (BSI-201)堿性唾液脯豐富蛋白3
貝倫格葡萄座腔梨生?;?/span> Nelfinavir Mesylate原粒蛋白16同源物B
鐮孢 Everolimus (RAD001)白彈性蛋白抑制因子
Aureimonas ureilytica Perifosine (KRX-0401)短腭肺鼻腔上皮癌關聯(lián)蛋白2
霉擬蠟孔 (水合物)鳥三磷環(huán)化水解1
薄黑孔 Licofelone周期B1
干草鞘氨單胞 白介36受體
抗霉鏈霉 Plerixafor 8HCl (AMD3100 8HCl)碳酐
秀珍菇 Pancuronium dibromide絲;蘇蛋白激B-raf
尿氧化節(jié)桿 LY294002/PI3K抑制劑SARSIgG抗體
枯草芽胞桿 2-(4-嗎啉基)-4H-萘并[1,2-B]吡喃-4-酮激肽釋放5
大腸埃希 阿比特龍肌原纖蛋白1
傳染性支氣管炎病 醋阿比特龍L-同型半胱
親和鏈霉 瑞替加濱肺炎鏈球IgG抗體
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