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甲酸脫鈣液

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 14:51:08瀏覽次數(shù):151次

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貨號 FS-X9988
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中文名稱:甲酸脫鈣液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:500ml

貨號:FS-X9988

產(chǎn)品介紹:

用途:

慢性脫鈣液,主要用于小塊組織,脫鈣同時可以對組織固定

注意事項:

主要由甲酸、福爾馬林組成,推薦用于小塊組織和牙齒的脫鈣,不推薦用于常規(guī)標本的脫鈣。

儲存條件:室溫,12個月

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

釀酒酵母卷曲螺旋結構域蛋白40抗體Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) 人血紅蛋白C(HbC)免疫試劑盒

白色短波單胞菌卷曲螺旋結構域蛋白114抗體Human ProSAAS/PCSK1N(granin-like neuroendocrine peptide) 人血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒

挪威畢赤酵母卷曲螺旋結構域蛋白39抗體Human GGH(Gamma-glutamyl hydrolase) 人血管抑/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)免疫試劑盒

華根霉卷曲螺旋結構域蛋白34抗體Human P2RY2(P2Y purinoceptor 2) 人血管性血友病因子裂解(ADAMTS-13/vWF-cp)免疫試劑盒

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微白類諾卡氏菌卷曲螺旋結構域蛋白12抗體Human TXB2(Thromboxane B2) 人血管生成1(ANG-1)免疫試劑盒

凱斯特鞘單胞菌卷曲螺旋結構域蛋白67抗體Human OT(Oxytocin) 人血管生長(ANG)免疫試劑盒

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薔薇生鏈格孢卷曲螺旋結構域蛋白107抗體Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) 人血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒

假單胞菌屬卷曲螺旋結構域蛋白18抗體Human Acetylated p53(Acetylated p53) 人血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒

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: 195-75資源名稱: 非O1群霍亂弧菌 質量規(guī)格:>99%,BRES1蛋白同系物,線粒體試劑盒胡薄荷

解脂假絲酵母Candida│lipolytica 質量規(guī)格:>98%,BREphrin-B2試劑盒紅花八角
甲酸脫鈣液輪紋大莖點 西洛多辛α淀粉1

云芝栓孔(變色栓) Iniparib (BSI-201)堿性唾液脯豐富蛋白3

貝倫格葡萄座腔梨生?;?/span> Nelfinavir Mesylate原粒蛋白16同源物B

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霉擬蠟孔 (水合物)鳥三磷環(huán)化水解1

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大腸埃希 阿比特龍肌原纖蛋白1

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親和鏈霉 瑞替加濱肺炎鏈球IgG抗體

 


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