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貨號 | FS-X10037 |
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產(chǎn)品介紹:
用途: 快速冰凍切片染色,細胞核復染 注意事項: HE冰凍切片染色中l(wèi)eagene推薦采用該染色液。類似于Mayer蘇木素,染色時間一般10分鐘 儲存條件:室溫,12個月 |
中文名稱:Carazzi蘇木素染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml|500ml
貨號:FS-X10037
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
亞美尼亞固氮菌降鈣基因相關肽1型受體抗體Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) 人柯薩奇病IgA(Cox V-IgA)免疫試劑盒
戊糖乳桿菌CD19抗體Human IKBKG(NF-kappa-B essential modulator) 人柯薩奇病A16(CVA16)抗體(IgM)免疫試劑盒
根瘤菌磷化CD19抗體Human LMAN1(Protein ERGIC-53) 人柯薩奇病A16(CVA16)抗體(IgG)免疫試劑盒
土壤桿菌屬淋巴趨化因子CCL21抗體Human LPAR1(Lysophosphatidic acid receptor 1) 人柯薩奇病A16(CVA16)免疫試劑盒
加拿大帚霉表面趨化因子受體2A抗體Human OVOS1(Ovostatin homolog 1) 人柯薩奇病(Cox V)抗體(IgM)免疫試劑盒
球毛殼菌表面趨化因子受體2B抗體Human MTX1(Metaxin-1) 人柯薩奇病(Cox V)抗體(IgG)免疫試劑盒
茶樹菇表面趨化因子受體2抗體Human LMAN1(Protein ERGIC-53) 人抗組織轉谷酰(tTG)抗體(IgG)免疫試劑盒
潰瘍棒狀桿菌金屬肽鏈內切抗體Human LPAR1(Lysophosphatidic acid receptor 1) 人抗組織轉谷酰(tTG)抗體(IgA)免疫試劑盒
羅磷傘鈣介質抗體Human MTX1(Metaxin-1) 人抗組蛋白抗體(AHA)免疫試劑盒
赭綠青霉表面趨化因子受體6抗體Human OVOS1(Ovostatin homolog 1) 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體免疫試劑盒
癤葡萄座腔菌胸腺活化調節(jié)趨化因子抗體Human MAOB(Amine oxidase [flavin-containing] B) 人抗組?;鵷RNA合成,質(HARS)抗體免疫試劑盒
馬拉交替紅色桿菌半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)Human OPRL1(Nociceptin receptor) 人抗內膜抗體(EMAb)免疫試劑盒
黃綠木霉CSMD1抗體Human IL17D(Interleukin-17D) 人抗滋養(yǎng)膜抗體(ATA)免疫試劑盒
德氏乳桿菌保加利亞亞種煙堿型乙酰受體α4抗體Human PKD1(Polycystin-1) 人抗著絲點抗體(ACA)免疫試劑盒
喜溫愛達荷犁頭霉表面趨化因子受體9抗體Human AXIN2(Axin-2) 人抗轉谷酰抗體(IgG)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母表面趨化因子受體5抗體Human PPP1CA(Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit) 人抗轉谷??贵w(IgA)免疫試劑盒
鐮刀菌Fusarium│sp. 質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑3-硝基酪試劑盒9-基
球毛殼Chaetomium│globosum 質量規(guī)格:離子對色譜用試劑3-羥基-3-基戊二酰合1試劑盒阿馬堿
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規(guī)格:離子對色譜用試劑3-葡萄糖孕二試劑盒阿奇霉
Carazzi蘇木素染色液天麻蜜環(huán)(京-234)* 4-溴-3,5-二促黃體生成;絨毛膜促性腺受體
假單胞屬 4-芐鹽鹽谷氨酰?;h(huán)化
樟疫霉 2,4-二-1,8-萘啶天門冬氨基轉移同工
噻唑-4-羧甲酯抗著絲粒蛋白F抗體
蟲花棒束孢 3,4-(亞甲基二氧基)苯脫氫1家族成員B1
Brenneria salicis 環(huán)吡酮雜質AJanus激2
多主葡萄殼 Fmoc-2-氨基異丁Janus激1
阪崎腸桿 1-Boc-3-吡咯烷甲促睡眠肽α
松塔牛肝 吡咯烷-3-甲抗sp100抗體
淺紫灰葉鏈霉 1-羥環(huán)己基苯酮色C還原核心蛋白1
新城疫病 3-(3,5-二氧基)-1,2-S亞硝基硫
鐮孢 鹽阿立必利干生長因子-B
短桿屬 噻吩磺(3-磺酰氨基-2-噻吩)微管關聯(lián)絲;蘇激2
釀酒酵母 2-氟-4-甲氧基苯甲谷脫氫
炭疽病 5-苯基吡唑-3-羧乙酯微管關聯(lián)絲;蘇激2
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