您好, 歡迎來到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> Scott藍(lán)化液
貨號(hào) | FS-X10040 |
---|
產(chǎn)品介紹:
用途: 又稱促藍(lán)液,用于蘇木素染色后藍(lán)化,尤其推薦用于Gill'sⅢ藍(lán)化蘇木素藍(lán)化。 注意事項(xiàng): 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
中文名稱:Scott藍(lán)化液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
貨號(hào):FS-X10040
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
Burkholderia metallica Vanlaere et al.促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子抗體Human S100A10(Protein S100-A10) 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)免疫試劑盒
泡盛曲霉5號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Human PRNP(Major prion protein) 人抗外切體復(fù)合物成分RRP45(EXOSC9)抗體免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌CD93抗體Human EGFL7(Epidermal growth factor-like protein 7) 人抗外切體成分10(EXOSC10)抗體免疫試劑盒
假單胞菌嗜粒趨化蛋白CCL6抗體Human STAT5B(Signal transducer and activator of transcription 5B) 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)免疫試劑盒
大莖點(diǎn)菌6號(hào)染色體開放閱讀框81抗體Human EBI3(Interleukin-27 subunit beta) 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)免疫試劑盒
仁果叢梗孢巨噬炎性蛋白1β抗體Human LILRA2(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2) 人抗突觸前膜抗體(PsmAb)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌NK抑制性受體2DL4抗體Human EGFL7(Epidermal growth factor-like protein 7) 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌NK抑制性受體2DS4抗體Human LILRB1(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1) 人抗透明帶抗體(aZP)免疫試劑盒
橄欖色盤多毛孢NK抑制性受體3DL1抗體Human ATP2A3(Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3) 人抗天然脫氧核糖核抗體(n-DNA-Ab)免疫試劑盒
黑曲霉7號(hào)染色體開放閱讀框46抗體Human ECE1(Endothelin-converting enzyme 1) 人抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒
白地霉蛋白磷PP2A癌抑制蛋白抗體Human NDNF(Protein NDNF) 人抗肽?;搧?型(PADI4)抗體 免疫試劑盒
岸海桿狀菌巨噬甘露糖受體CD206抗體Human IFNA14(Interferon alpha-14) 人抗髓鞘少突膠質(zhì)糖蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒
淋巴衍生C-型凝集抗體Human C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) 人抗髓磷脂相關(guān)糖蛋白(MAG)抗體免疫試劑盒
腸桿菌屬5號(hào)染色體開放閱讀框60抗體Human UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) 人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)免疫試劑盒
霍氏腸桿菌CD44V5抗體Human PLA2G2A(Phospholipase A2, membrane associated) 人抗蘇酰基tRNA合成,線粒體(TARS2)抗體免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌22號(hào)染色體開放閱讀框23抗體Human TNFRSF10B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B) 人抗蘇?;鵷RNA合成,質(zhì)(TARS)抗體免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑Ⅱ型膠原試劑盒大戟因子L1
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:用于類的熒光離子對(duì)試劑Ⅱ型肺泡表面抗原試劑盒13-去羥基印烏堿
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%28S抗核糖體抗體試劑盒新知母皂BII
Scott藍(lán)化液異常漢遜酵母 3,5-二氟苯甲基質(zhì)金屬蛋白19
粟酒裂殖酵母 3-氟-4-嗎啉基苯基質(zhì)金屬蛋白20
深凹杯傘 2--3-(三氟甲基)苯甲乙酰CoA羧化2
槐生多年臥孔 2,4-二噻唑-5-甲D類清道夫受體8
綠色木霉 3-正基吡唑-5-甲乙酯蛋白激c eta型
鴨疫里氏桿 葉解整合金屬蛋白23
皮殼青霉 反式-2-己烯聚乙二主鏈的IgM抗體
麥根腐平臍蠕孢 苯海拉明微管關(guān)聯(lián)蛋白R(shí)P;EB家族成員1
大腸桿 氧雜蒽15-脂氧合
多主葡萄殼 3-乙酰乙基葡萄糖
耐寒短桿 N-Boc-D-天冬 1-芐酯富含脯同源蛋白1抗體
大腸埃希氏 3-甲羥基氮雜環(huán)丁烷鹽鹽二肽基肽
中間普氏 2-氨基-6-煙色B還原1
平田頭菇3-1 3-羥基-4-(1-萘基偶氮)-2,7-萘二磺二鈉可溶性白分化抗原40配體
鐮雄腐霉 萘AS脫羧S-腺蛋
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。