您好, 歡迎來到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 異染顆粒染色液(改良Albert法)
貨號(hào) | FS-X10157 |
---|
產(chǎn)品介紹:
用途: 異染顆粒染色,干燥棒桿菌染色 注意事項(xiàng): 異染顆粒呈黑色,菌體呈淡藍(lán)色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
中文名稱:異染顆粒染色液(改良Albert法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×20ml|2×50ml
貨號(hào):FS-X10157
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
曲霉F-box蛋白9抗體Human ZPBP 馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)免疫試劑盒
昆明靈芝脂肪酰基還原1抗體Human ZO-2 馬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
輪紋大莖點(diǎn)菌生長抑制基因39蛋白抗體Human ZNF740 馬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
云芝栓孔菌(變色栓菌)磷神經(jīng)膜抗體Human ZNF74 馬錳超氧化物歧化(Mn-SOD/SOD2)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;痛嘈?/span>X相關(guān)蛋白1抗體Human ZRANB2 馬免疫試劑盒
鐮孢菌F-box蛋白家族FBXO31抗體Human ZNF746 馬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
Aureimonas ureilytica卵巢濾泡激抗體(BHD綜合征)Human ZRANB3 馬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
霉擬蠟孔菌羊抗抗體Human ZNF750 馬黃體生成(LH)免疫試劑盒
薄黑孔菌FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子7抗體Human ZNF785 馬環(huán)磷腺(cAMP)免疫試劑盒
干草鞘單胞菌脂肪結(jié)合蛋白5抗體(上皮型)Human ZNF774 馬環(huán)磷鳥(cGMP)免疫試劑盒
抗霉菌鏈霉菌脂氧受體1抗體Human ZNF846 馬過氧化氫(CAT)免疫試劑盒
秀珍菇半胱蛋白8相關(guān)蛋白2抗體Human ZNF763 馬還原(GSR)免疫試劑盒
尿氧化節(jié)桿菌叉頭蛋白F1抗體Human ZNF839 馬睪(T)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌高嗜性粒綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體Human ZNHIT1 馬促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
大腸埃希菌叉頭蛋白D4Human ZNHIT2 馬促卵泡(FSH)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病磷化細(xì)絲蛋白A抗體Human ZNF703 馬雌激(E)免疫試劑盒
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(HPLC)羅漢果皂ⅢA1
鏈格孢Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%靈芝A
曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%異-羅漢果皂 V
異染顆粒染色液(改良Albert法)異常畢赤酵母 2-巰基-5-苯并噻唑山梨脫氫
枯草芽孢桿 4-氨基-2-溴苯鹽還原
蠟狀芽孢桿 4-氨基-2-氟苯腺環(huán)化1
芽胞桿 O-甲基異脲鹽鹽乙酰羧化1
噬幾丁質(zhì)屬 2-氨基-5-木質(zhì)合成
湖泊黃桿 2,6-二溴對(duì)咖啡-O-甲基轉(zhuǎn)移
側(cè)孢短小芽胞桿 2,7-二芴-4-環(huán)氧乙烷尼克酰
少根根霉 4-苯甲酰乙甲酯芳樟合成
擬土黃紅菇 2-甲氧基-4-香葉合成
十字斯氏格孢 2-溴-5-氨肽
美澳型核果褐腐病 2-甲氧基-6-25-羥膽鈣化
蓖麻炭疽盤孢 6-甲氧基異喹啉線粒體異檸檬脫氫
漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇) 烯氧基苯硫色脫羧
大腸埃希 4,6-二羥基-1,3-間苯二甲甲酯羥基-O-甲基轉(zhuǎn)移
小環(huán)綿盤 2-氨基-5-溴煙5-羥色-N-乙酰轉(zhuǎn)移
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。