當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TTPA人組織多肽抗原ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | TPA人組織多肽抗原ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Tissue Polypeptide Antigen, TPA Elisa Kit |
貨號 | FS-H63401 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Fusarium│culmorum (W.G. Sm.) Sacc. 黃色鐮刀菌Fusarium│culmorum (W.G. Sm.) Sacc.分離基物:落葵葉斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:99%
Paecilomyces hepialus Chen & Dai 蝙蝠蛾擬青霉菌Paecilomyces hepialus Chen & Dai分離基物:幼蟲斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:noPDA:馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注] 馬鈴薯提取液:取去皮馬鈴薯200g,切成塊,加1.0L煮沸30min,濾去馬鈴薯塊,將濾液補足至1.0L。生長條件:25℃,好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%
Phellinus│linus (Berk. & M.A. Curtis) ng 裂蹄木層孔菌Phellinus│linus (Berk. & M.A. Curtis) ng分離基物:枯立木斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:>98.0%(GC)
Alrnaria│sp. 交鏈孢屬Alrnaria│sp.分離基物:丁香斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:>98.0%(GC)
Arthrobacr│nicotianae Giovannozzi-Sermanni #煙草節(jié)桿菌Arthrobacr│nicotianae Giovannozzi-Sermanni分離基物:葉片斜面培養(yǎng)物模式菌株:no益生菌141生長條件:32存儲條件:定期移植法 純度:98%
Trames│robiniophila Murrill *槐耳Trames│robiniophila Murrill斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Bacillus│firmus Bredemann and Werner 堅強芽孢桿菌Bacillus│firmus Bredemann and Werner分離基物:根表斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no141生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:97%
Monilinia laxa (Aderh. & Ruhland) Honey 核果褐腐病菌Monilinia laxa (Aderh. & Ruhland) Honey分離基物:自然發(fā)病果斜面培養(yǎng)物模式菌株:no綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:22-26℃,好氧存儲條件:定期移植法 純度:97%
TPA人組織多肽抗原ELISA試劑盒實驗原理phospho-CBL2(Tyr774) 磷化原癌蛋白CBL2抗體倍他索3-苯甲酰Human IL-10 (Interleukin 10) ELISA Kit
RUNX2 (Runt-related Tranion Factor 2)CBFA1/ 成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體多潘立3-苯甲酰Human IL-13 (Interleukin 13) ELISA Kit
CBP/CREBBP CREB結(jié)合蛋白抗體法莫替丁3-溴苯甲酰Human IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit
HP1 gamma 異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體枸櫞己定3-溴苯甲酰Human IL-22 (Interleukin 22) ELISA Kit
Phospho-HP1 gamma (Ser83) 磷化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體維A(1S,2S)-N,N'-雙[3-氧代-2-(2,4,6-三酰)亞丁基]-1,2-二苯基乙二胺合鈷(II)Human IL-23 (Interleukin 23) ELISA Kit
CBX5 CBX5抗體氫噻PosaconazoleHuman IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit
Cbx8 染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體鹽阿米洛利4--α-乙烯Human TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit
CCK8 膽囊收縮素抗體3,5-二氨基-6-吡-2-羧甲酯4-(N,N-二甲氨基)苯頻那酯Human TGF-β1 (Transforming Growth Factor Beta 1) ELISA Kit
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