當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TFE人鐵蛋白ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | FE人鐵蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human ferritin, FE Elisa Kit |
貨號 | FS-H63398 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Arthrinium│phaeospermum (Corda) M.B. Ellis 暗色節(jié)菱孢Arthrinium│phaeospermum (Corda) M.B. Ellis分離基物:南林351楊斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al 膠質芽孢桿菌Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no141生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:96%
Streptomyces│avidinii Stapley et al 阿維丁鏈霉菌Streptomyces│avidinii Stapley et al分離基物:灘涂斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no12生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:96%
Trames robiniophila Murrill 槐多年臥孔菌(斜面)Trames robiniophila Murrill分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3.0g,七鎂 1.5g,葡萄糖 20.0g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧存儲條件:定期移植法 純度:98%
Diaporthe│vexans Gratz 茄褐紋擬莖點霉Diaporthe│vexans Gratz分離基物:茄子斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:98%
Corticium│roseocarneum (Schwein.) Hjortstam 紅紫韌革菌Corticium│roseocarneum (Schwein.) Hjortstam斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Bacillus│larespore Laubach 側孢芽孢桿菌Bacillus│larespore Laubach分離基物:楊柴根系土壤斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no141生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:97%
Alrnaria│nuissima (Kunze) Wiltshire 細鏈格孢菌Alrnaria│nuissima (Kunze) Wiltshire分離基物:果實斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:≥97% (HPLC)
FE人鐵蛋白ELISA試劑盒實驗原理Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷化半胱氨蛋白酶9抗體尼莫地平AprepitantHuman Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit
Phospho-Caspase-9 (Try153) 磷化半胱氨蛋白酶9抗體蒿甲雙-D-甘露糖Human G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit
Caveolin-1 質膜微囊蛋白-1抗體金諾芬雙-D-甘露糖Human GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit
Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 磷化質膜微囊蛋白-1抗體鹽卡特羅甲基-三[二甲基硅氧烷基]硅烷Human GM-CSF (Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit
Caveolin-3 質膜微囊蛋白-3抗體氨魯米特四[二甲基硅氧烷基]硅烷Human sgp130 (soluble Glucoprotein 130) ELISA Kit
Alpha-Catenin α-連環(huán)蛋白抗體大豆油四[二甲基硅氧烷基]硅烷Human HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit
Beta catenin β-連環(huán)蛋白抗體(β鏈接素)對羥基苯甲甲酯2,5-二Human IFN-β (Interferon Beta) ELISA Kit
phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷化β 連環(huán)素蛋白抗體泛鈉2,5-二Human IGF-1 (Insulin-Like Growth Factor 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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