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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 死細(xì)胞核7-AAD染料
貨號(hào) | FS-X9816 |
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產(chǎn)品介紹:
本產(chǎn)品適用于細(xì)胞核酸染色,可應(yīng)用于熒光顯微鏡、激光共聚焦計(jì)或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一種核酸染料,它不能通過(guò)正常質(zhì)膜,隨著細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡過(guò)程,質(zhì)膜對(duì)7-AAD的通透性逐漸增加,結(jié)合細(xì)胞凋亡中DNA的有控降解,在合適波長(zhǎng)激發(fā)光的激發(fā)下可發(fā)出明亮的紅色熒光,通過(guò)7-AAD標(biāo)記DNA的強(qiáng)弱,將細(xì)胞分為三群:7-AAD強(qiáng)為死亡細(xì)胞,7-AAD弱是凋亡細(xì)胞,7-AAD-為正?;盍?xì)胞。7-AAD同PI有著相似的熒光特性,但其發(fā)射波譜較PI窄,對(duì)其他檢測(cè)通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI 的佳替代品,可與Annexin V-EGFP/FITC/PE聯(lián)合使用。 注意事項(xiàng) 1. 7-AAD 避光保存及使用。 2. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。 操作說(shuō)明 1.超純水可配制1mg/ml 的7-AAD 儲(chǔ)液,避光,2-8℃保存。 2.7-AAD 的工作濃度建議為2ug/ml,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行微調(diào)優(yōu)化。 3.熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD 熒光信號(hào)呈紅色。 儲(chǔ)存:-20℃,避光,有效期12個(gè)月。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
7-amino-actinomycin D | 1mg | FS-X9816 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
α-胞襯蛋白(SPTAN1)英文名:SPTAN1 鈣連蛋白抗體包裝500g
α白蛋白(AFM)英文名:AFM 二氫嘧啶相關(guān)蛋白2抗體包裝50mg
α2-纖溶抑制因子(α2PI)英文名:α2PI 色P450ⅡE1抗體包裝1g
α2-巨球蛋白(α2M)英文名:α2M 趨化因子受體1抗體包裝100g
α2-HS糖蛋白(αHSG)英文名:αHSG 磷化原癌基因c-Raf抗體包裝25g
α1-微球蛋白(α1M)英文名:α1M 磷化致癌基因C-Myc抗體包裝500g
α1-性糖蛋白(α1AGP)英文名:α1AGP CD33抗體包裝1g
α1-抗(α1AT)英文名:α1AT 磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g
Zeste同源物增強(qiáng)子1(EZH1)英文名:EZH1 磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g
YY肽(PYY)英文名:PYY 離子通道蛋白3抗體包裝25g
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)英文名:XRCC6 磷化周期E抗體包裝5g
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白5(XRCC5)英文名:XRCC5 磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝250mg
X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)英文名:XBP1 磷化周期依賴性激9抗體包裝1g
Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)英文名:WFS1 磷化Connexin 43蛋白抗體包裝5g
WNT1誘導(dǎo)信號(hào)通道蛋白1(WISP1)英文名:WISP1 絲切蛋白抗體包裝100g
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度98%以上異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G試劑盒乙酰纈草三酯;Acevaltratum
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E試劑盒乙酰哈巴;8-O-Acetylharp
CGMCC1.5361=JCM14000資源名稱: 黃微球菌 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D試劑盒異型南五味子丁;Heterocliti
死細(xì)胞核7-AAD染料食淀粉乳桿 5-氟-2-甲酰基苯水痘-帶狀皰疹病IgM抗體
冷海水黃桿 4-溴甲基四氫吡喃Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激
球孢白僵 六基鈷(II)鐵(II)乙型肝炎病E抗體
枯草芽孢桿斯氏亞種 二(六氟銻)三乙(五甲基環(huán)戊二烯基)銠(III)乙型肝炎病核心抗體
秦氏蜜環(huán) 肝再生增強(qiáng)因子
嗜鹽擬諾卡氏 C. I. 顏料紅 49糖化血紅蛋白A1c
瘦弱鹽扁平 2,3-二氟苯重組高遷移率族蛋白B1
相思根瘤 2-氟-4-單純皰疹病2IgG抗體
美澳型核果褐腐病 2-溴-6-苯單純皰疹病2IgM抗體
米曲霉 6-氟-2-吡啶磺酰單純皰疹病6IgG抗體
白僵 2-甲氧基-3-氟-5-溴吡啶單純皰疹病6IgM抗體
溶壁(lywallzyme) 3-溴-2-甲氧基-5-三氟單純皰疹病7IgG抗體
大腸埃希氏 Fmoc-Lys(5-FAM)-OH單純皰疹病7IgM抗體
美澳型核果褐腐病 3-溴-5-EB病IgG抗體
大腸埃希 十八烷基二甲基叔EB病IgM抗體
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