ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Acinetobacr woffii 魯氏不動桿菌Acinetobacr woffii凍干物安全等級:2模式菌株:腦心浸液（BHIA）：牛腦浸 4.0g，牛心浸 4.0g，蛋白胨 5.0g，酪蛋白胨16.0g，NaCl 5.0g，葡萄糖 2.0g，磷氫二鈉 2.5g，pH7.4 ± 0.2。121℃，15min。生長條件:28℃，好氧，24h存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Pseudomonas│sp. 假單胞菌Pseudomonas│sp.分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no在無機鹽培養(yǎng)基:中以100mg/L的鄰二酚為碳源培養(yǎng)，3天內(nèi)降解率大于90%33生長條件:30℃ 純度：98%

Arthrobacr│sp. 節(jié)桿菌Arthrobacr│sp.分離基物:廢排污口土壤和廢混合物凍干物安全等級:1模式菌株:no用于阿特拉津農(nóng)藥廢處理及受污染土壤的生物修復(fù)858生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Nocardioides│sp. 類諾卡氏菌Nocardioides│sp.分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no820生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Escherichia│sp. 埃希氏菌Escherichia│sp.凍干物安全等級:2模式菌株:no致病大腸桿菌2生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Sphingobacrium│sp. 鞘氨醇桿菌Sphingobacrium│sp.分離基物:河凍干物安全等級:1模式菌株:no異養(yǎng)反硝化2生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Methylobacrium│sp. 甲基桿菌Methylobacrium│sp.凍干物安全等級:1模式菌株:no794生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Ensifer│adhaerens 粘著劍菌Ensifer│adhaerens分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no分類；研究；教學(xué)832生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%
PLC人磷酯酶CELISA試劑盒實驗原理TNFSF4  腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體磷化蛋白激酶B抗體(全己基)乙烯Mouse  DKK3 (Dickkopf Related Protein 3) ELISA Kit

OX40/CD134/TNFRSF4  CD134抗體磷化水通道蛋白2抗體CHIR-99021Mouse NE (Neutrophil Elastase ) ELISA Kit  

TNF-beta  腫瘤壞死因子-β抗體磷化APP淀樣肽前體蛋白抗體三磺鐿水合物Mouse ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit  

TNFAIP1  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體磷化蛋白激酶B抗體三磺鐿水合物Mouse ELN (Elastin) ELISA Kit  

TNFSF14  腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體磷化APP淀樣肽前體蛋白抗體三磺鐿水合物Mouse EMILIN1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit  

TNFAIP3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體磷化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體3-乙酰-2,5-二甲基噻吩Mouse ELOA (Elongin A) ELISA Kit  

Acetylated-p53 (Lys382)  乙?；疨53(Lys382)抗體磷化雄激素受體抗體3-乙酰-2,5-二甲基噻吩Mouse EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit  

TNFSF18  腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體磷化雄激素受體抗體四丁酚Mouse EMAb (Endometrium Antibody) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)