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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TICE人白介素1β轉(zhuǎn)換酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ICE人白介素1β轉(zhuǎn)換酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Interleukin 1β converting enzyme, ICE Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63834 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Sporobolomyces│sp. 擲孢酵母Sporobolomyces│sp.分離基物:植物凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no13生長條件:17℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Streptomyces│caelestis 天青鏈霉菌Streptomyces│caelestis凍干物安全等級(jí):1Type strain; Produces celesticetin331生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:1 M in trahydrofuran
Streptomyces mobaraensis 茂原鏈霉菌Streptomyces mobaraensis凍干物安全等級(jí):1模式菌株:;產(chǎn)生bleomycin, detoxin, piericidins A, B.ISP-2培養(yǎng)基::酵母提取物 4.0 g,麥芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH7.3。121℃,15min。生長條件:28℃,好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98%
Cladosporium│sp. 枝孢Cladosporium│sp.分離基物:樹皮斜面培養(yǎng)物;凍干物模式菌株:no產(chǎn)生物14生長條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%
Penicillium│granulatum 粒狀青霉Penicillium│granulatum凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no13生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Halomonas│aquamarina 海鹽單胞菌Halomonas│aquamarina分離基物:bull凍干物安全等級(jí):1模式菌株:223生長條件:26℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Halomonas│sulfidaeris 硫化物礦鹽單胞菌Halomonas│sulfidaeris分離基物:sulfide rock凍干物安全等級(jí):1模式菌株:223生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Georgenia│muralis 墻壁圣格奧爾根菌Georgenia│muralis分離基物:土壤凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no832生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:99%
ICE人白介素1β轉(zhuǎn)換酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理TPH 色氨羥化酶抗體血管緊張素III抗體β-6'-羥基異辛可寧Mouse Ear 14 (Eosinophil-associated, ribonuclease A family, member 14) ELISA Kit
TPO 甲狀腺過氧化物酶抗體腺苷環(huán)化酶3抗體羰酰二氫三(三苯基膦)釕(II)Mouse ECFR (Eosinophil chemotactic factor receptor) ELISA Kit
TRA16 激素受體相關(guān)蛋白16抗體血管動(dòng)蛋白抗體十一烷基-β-D-麥芽糖苷Mouse ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit
TRA16 激素孤兒受體相關(guān)蛋白抗體腺病早期E1A蛋白抗體喹唑啉Mouse MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit
TRADD 死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體磷化活化復(fù)制因子2抗體喹唑啉Mouse EPCAM (Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit
TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體磷化活化復(fù)制因子2抗體Boc-L-beta-谷氨 5-芐酯Mouse ENA-78 (Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78) ELISA Kit
TRAF2 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體磷化失調(diào)癥蛋白1抗體Boc-L-beta-谷氨 5-芐酯Mouse EPOR (Erythropoietin receptor) ELISA Kit
TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體5,10,15,20-四(五苯基)卟啉Mouse UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit
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