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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>酯酶系列>> 堿性磷酸酶(AKP/ALP)測(cè)試盒微量法
貨號(hào) | BJ-01611124-1 |
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
堿性磷酸酶(AKP/ALP)測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | BJ-01611124-1 |
商品介紹:
測(cè)定意義: AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶,在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。 測(cè)定原理: 在堿性環(huán)境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基安替bi林和鐵氰hua鉀反應(yīng)紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測(cè)定510 nm吸光度增加速率,來計(jì)算AKP活性。 自備儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
鈣/鈣調(diào)su依賴蛋白激酶2α抗原宇佐美曲霉十八種氨基酸(套)Eighteen kinds of amino acids?(set)
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原掌狀花耳唑林雜質(zhì)ECefazolin?impurity E
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β1(抗原)微小桿菌重組胰島su單體-二聚體Two?recombinant insulin?monomer?-?dimer
鈣/鈣調(diào)su依賴蛋白激酶2b抗原委內(nèi)瑞拉鏈霉菌氟尿苷Floxuridine
Park7/DJ-1/CAP1抗原節(jié)桿菌屬Hyaluronidase
環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原環(huán)狀芽胞桿菌纖維蛋白原Fibrinogen
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽稻平臍孺孢哥倫比亞瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基The control?Columbia?agar?culture mediu
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β3(抗原)生脂固氮螺菌豬磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIκBα)elisa定量檢測(cè)試劑盒
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2(多肽抗原)枯草芽孢桿菌豬抗糖蛋白抗體(GP)elisa定量檢測(cè)試劑盒
α-1 (-Thymosin alpha-1)植物乳桿菌植物亞種豬酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)elisa定量檢測(cè)試劑盒
半胱酸蛋白mei蛋白-12(多肽)草螺菌屬豬間隙連接蛋白26(CX26)elisa定量檢測(cè)試劑盒
半胱酸蛋白mei蛋白-12抗原(人)苔類芽孢桿菌豬抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)elisa定量檢測(cè)試劑盒
膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(多肽)斯高特白冬孢酵母豬可溶性糖蛋白130(sgp130)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原)漆柄小孔菌豬蛋白激酶Bγ(PKBG)elisa定量檢測(cè)試劑盒
重組人腫瘤壞死因子巨型艾美耳球蟲豬Pirin蛋白(PIR)elisa定量檢測(cè)試劑盒
堿性磷酸酶(AKP/ALP)測(cè)試盒微量法血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)試劑盒Anti-KIF3A Antibody轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2(TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ)
Slit同源物2(Slit2)試劑盒Anti-KIN Antibody轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體1
成纖維生長(zhǎng)因子受體底物2(FRS2)試劑盒Anti-KIF2C Antibody(PB0228)甲狀腺過氧化物酶
膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒 Anti-KIN Antibody腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白
內(nèi)臟脂肪特異性絲an酸蛋白mei抑制因子(VASPIN)試劑盒Anti-KISS1R Antibody生精凋亡相關(guān)基因3
成纖維生長(zhǎng)因子受體4(FGFR4)試劑盒 Anti-KISS1R Antibody狀腺suT3
類胰蛋白mei(TPS)試劑盒Anti-KIT Antibody按蚊硫酯包含蛋白-1
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