當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>進口elisa試劑盒>>其它elisa試劑盒>> 48T/96T鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)elisa試劑盒
選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)elisa試劑盒
英文名稱:Duck neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
苊(標準品)Carfilzomib2-巰基-5-并噻唑
二基與基磺酸鈉的聚合物His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)并噻唑-2-甲
二胍(標準品)ROS1 (D4D6®) Rabbit mAb (HRP Conjuga)N-甲基吲哚
1?;?9-羥基巴卡丁III(標準品)YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并吡
(+)-冰片(標準品)Neurofascin 186 (D6G6O) Rabbit mAb甲氧基甲甲酸酯
酸龍腦酯(標準品)Neurofascin 155 (D7B6O) Rabbit mAb2,2,三溴
二氫丹參酮(標準品)Neurofascin 155 (D7B6O) Rabbit mAb1,雙(2,二氨基氧基)烷
銻標準溶液(1000μg/ml,基體:6.0 mol/L HCl)Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb三氟甲氧基酰
銻標準溶液(1000μg/ml,,溶劑:鹽酸)Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb7-氮雜并三唑-1-基氧基三(二基)膦六氟酸鹽
銻標準溶液(100mg/L,溶劑:1%鹽酸)Lamin B1 (D9V6H) Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-溴-4,5-二氟甲酸甲酯
銻標準溶液(100mg/L(20℃), 基體: 20%HCl)HER3/ErbB3 (D22C5) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)(R)-1-Boc-氨甲基哌啶
銻標準溶液(分析標準品,1.24±0.26mg/L)His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)氨基.硫酸鹽
砷標準溶液(1000μg/ml,溶劑:1mol/L硝酸)Bcl-2 (124) Mouse mAb氨基-羧基氧基吡唑
砷標準溶液(100mg/L,溶劑:微量硫酸)Bcl-2 (124) Mouse mAb(甲基哌-1-基)甲
砷標準溶液(100µg/mL,基體:1%HNO3)DDX41 (D3F1Z) Rabbit mAb-2,二氟
砷標準溶液(0.500μg/g,基體:0.2%(v/v)H2SO4,K+2.2mg/L,Na+23mg/L,Cl-37mg/L)PathScan® Total FGF Receptor 4 Sandwich ELISA Kit三氟甲基-2-羥基喹啉
標準溶液(1000μg/ml,溶劑:水)DMT1/SLC11A2 (D3V8G) Rabbit mAb5--2,二甲氧基
標準溶液(100µg/mL,基體:水)HRS (D7T5N) Rabbit mAb2-氟-甲酸酯
鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)elisa試劑盒6-芐氨基嘌呤 for plant cell culture,≥99.0%小鼠血清白蛋白抗體正基萘胺攝入法細菌膜損傷熒光檢測試劑盒2-甲氧基基酸 97%血小板源性生長因子受體-A抗體流式免疫組化4-溴吲哚 98%黑素皮質(zhì)素4受體抗體正常大鼠(Sprague Dawley)腸組織微粒體組分(5毫克/毫升)N-甲基-N-*基硅烷三胺 GC,≥98.5%L-組氨酸鹽酸鹽一水物3-吲哚丁酸 98%黑素皮質(zhì)素受體5抗體正常大鼠(Sprague Dawley)肺組織微粒體組分(5毫克/毫升)N-甲基-N-*基 95%1-羥基并三氮唑一水物3-吲哚丁酸 分析標準品,99.5%甲狀腺激素轉(zhuǎn)運蛋白/單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白7/8抗體正常大鼠(Sprague Dawley)肝組織微粒體組分(5 毫克/毫升)炔酸甲酯 97%甘氨酸鎂3-吲哚丁酸 Standard for GC絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK2抗體正常大鼠(Sprague Dawley)腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)4-甲基-3-硝基吡啶 97%過氧化物酶(辣根)1-萘乙酸 96%磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK2抗體正常男性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升)2-甲基-3-丁炔-2- 98%鹽酸克林霉素代異烷 分析標準品,≥99.7% (GC)基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體正常男性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升)3-甲氧基基酸 97%2-甲酸代異烷 CP,97%磷酸化蛋白激酶MST2抗體正常女性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升)4-甲氧基基酸 97%丁二酸鈉六水合物
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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