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選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:植物環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa試劑盒
英文名稱:Plant cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液?
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。?
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
2-氯-5-甲氧基嘧啶 22536-65-8氯草靈 標準品 號:1967-16-4 250mg巨噬細胞來源趨化因子(MDC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)>98.0%(GC)
2-氯-5-甲氧基嘧啶 22536-65-8氯丹 標準品 號:12789-03-6 250mg基質金屬蛋白酶7(MMP7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)>98.0%(GC)
2,5-二氯嘧啶 22536-67-0標準品 號:5103-71-9 10mg基質金屬蛋白酶8(MMP8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2,5-二氯嘧啶 22536-67-0號:66514-88-3 1ml膽囊收縮素A受體(CCKAR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2,5-二氯嘧啶 22536-67-0號: 66429-41-2 1ml膽囊收縮素A受體(CCKAR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
三乙基氫化鋰 22560-16-3γ-Chlordane(trans)標準品 號: 5103-74-2 50mg神經(jīng)生長因子(NGF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1M in THF
三乙基氫化鋰 22560-16-3(+)-trans-Chlordane標準品 號: 66514-87-2 1ml神經(jīng)生長因子(NGF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1M in THF
三乙基氫化鋰 22560-16-3(-)-trans-Chlordane 標準品 號:142433-24-7 1ml神經(jīng)生長因子(NGF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1M in THF
2-苯基乙基異硫代酸酯 2257-09-2
四氯乙磷 標準品 號:54593-83-8 50mg神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)99%
2-苯基乙基異硫代酸酯 2257-09-2
氟唑蟲清標準品 號: 122453-73-0 100mg神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)99%
1,2--d4 22581-63-1殺螨酯 標準品 號:80-33-1 100mg神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(D, 99%)
(+)-兒茶素 水合物 225937-10-0標準品 號: 470-90-6 250mg神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥95%(HPLC)
(+)-兒茶素 水合物 225937-10-0氟定脲 標準品 號:71422-67-8 250mg神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥95%(HPLC)
(+)-兒茶素 水合物 225937-10-0氯苯胍亭標準品 號: 55-56-1 250mg神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥95%(HPLC)
5-氯煙酸 22620-27-5氯草敏 標準品 號:1698-60-8 250mg骨保護素(OPG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
大鼠C肽(C-Peptide)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Mucor rouxii
人胰島素(INS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Polaromonas vacuolata
小鼠胰島素(INS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Hymenochaete attenuata
猴胰島素(INS)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
豬胰島素(INS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus oryzae
大鼠胰島素(INS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Itersonilia pannonica
兔子胰島素(INS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptococcus dysgalactiae
人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus niger
植物環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa試劑盒人口腔黏膜上皮細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人類風濕關節(jié)炎滑膜成纖維細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
人類直腸平滑肌細胞,HRSMCTR細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
人卵巢間質細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
人毛發(fā)外根鞘細胞,HHRSCL細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
人角質細胞,HHFK細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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