當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>進口elisa試劑盒>>其它elisa試劑盒>> 48T/96T犀牛皮質(zhì)酮(CORT)elisa試劑盒
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 犀牛皮質(zhì)酮(CORT)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rhinoceros Corticosterone,CORT ELISA kit |
貨號 | GOY-R74922 |
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450 nm處測吸光值。
犀牛皮質(zhì)酮(CORT)elisa試劑盒操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
二(AR,99.5%,含50-150ppm異戊穩(wěn)定劑)β-Amyloid Antibody對甲酰基甲酸甲酯
二(for GC,≥99.8%,含50-150ppm戊穩(wěn)定劑)Rad23A (D7U7Z) Rabbit mAb2-氨基-5-溴-硝基三氟甲
二(ACS ,≥99.5%)PSMA2 Antibody1-Cbz-氨甲基哌啶
二甲基亞砜(AR,>99%(GC))PSMA3 Antibody2,5-二溴-氟吡啶
二甲基亞砜(>99.8%(GC))PSMA5 (K231) Antibody9-溴蒽
二甲基亞砜(分子生物學,≥99.9%)Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (PerCP-Cy5.5® Conjuga)呋喃酚
二甲基亞砜(多肽合成SMA5 (T14) Antibody5-溴-2-
二甲基亞砜(藥用級)PhosphoPlus®DARPP-32 (Thr34) Antibody Duet1H-吲唑-5-
甲(AR,99.5%)PSMA6 Antibody1,2-二甲基-5-羥基-吲哚甲酸酯
甲(無水級,99.8%)AMPA Receptor (GluA2/3/4) Antibody5--2-噻吩叔丁基磺酰
甲(≥99.9%(GC))Phospho-Rac1/cdc42 (Ser71) Antibody2--羥基-5-氟嘧啶
甲(ACS)Phospho-Rac1/cdc42 (Ser71) Antibody氟-2-羥基吡啶
甲(色譜級+, ≥99.9%)Cdc42 Antibody溴-2-甲
甲(蛋白測序級,≥99.9%)Puma (D7L9L) Rabbit mAb (Rodent Specific)(R)-(+)-環(huán)氧烷
甲(用于揮發(fā)性有機物的GC/MS分析, ≥99.9%)VEGF-B Antibody環(huán)磺酰
(95%) (AR,95.0%)PTCH2 (L849) Antibody1,2-二氨基-3,二氟
(95%) (for HPLC)Rac1/2/3 Antibody2--吡啶
(95%) (GR,95.0%)Rac1/2/3 Antibody2-氟-基-吡啶
乙酸乙酯 AR,99% 胃動素抗體二仲丁胺 99%單孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒乙 CP甘露聚糖結(jié)合凝集素抗體二胺 97%血球鏈菌探針法熒光定量PCR試劑盒乙 GR,99%膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體二正辛胺 97%捻轉(zhuǎn)血矛線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒甲氧基乙酸甲酯 99%結(jié)核分枝桿菌Ag85B抗體二乙氧烷 99%禽皰疹病通用探針法熒光定量PCR試劑盒1-萘甲 98%磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體1,3-二烷 98%禽皰疹病1型探針法熒光定量PCR試劑盒2-甲氧基萘 98%磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體N,N-二異基乙胺 99%藍氏賈第鞭毛蟲B型探針法熒光定量PCR試劑盒棕櫚酸棕櫚酯 95%人水痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體4,6-二-2-甲硫基嘧啶 98%同性戀螺桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒2-并噁唑啉 98%黑色素瘤相關(guān)抗原G1/肝癌相關(guān)蛋白4抗體二正丁胺 CP,88% 單純皰疹病1型探針法熒光定量PCR試劑盒
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