當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 琥珀酸脫氫酶(SDH)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6575 |
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商品介紹
測定意義 SDH(EC 1.3.5.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。SDH是線粒體的一種標志酶,位于線粒體內(nèi)膜上的一種膜結(jié)合酶,是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外,為多種原核細胞產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子。 測定原理 SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸,脫下的氫通過吩嗪二甲酯硫酸(PMS)傳遞還原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm處具有特征吸收峰,通過600nm吸光度的變化,測定2.6-DPIP的還原速度,代表SDH酶活性。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6575 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
支鏈酸轉(zhuǎn)氨2抗體Human GSG1L ELISA Kit人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒,EAR12 ELIS
BCL2相關(guān)蛋白A1抗體Human GSPT2 ELISA Kit人干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒,
B瘤蛋白3抗體Human GPRIN3 ELISA Kit人蛋白1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒,
轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體Human GPS2 ELISA Kit人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒,
防御素β1/Defensin β1抗體Human GPSM2 ELISA Kit人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒,
B活化因子受體抗體Human GPX4 ELISA Kit人功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒,
TNF家族B激活因子抗體Human GPX7 ELISA Kit人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒,
蛇巴曲抗體Human GPX5 ELISA Kit人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒,
琥珀酸脫氫酶(SDH)微量法檢測試劑盒三(二亞芐酮)二鈀 Pd 21.5%Anti-GAPDH(human)/FITC 熒光素標記3-甘油脫氫(人)抗體IgG大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨激2(Tie-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
4-芐氧酚 98%Anti-GAPDH(rat、mouse)/FITC 熒光素標記3-甘油脫氫(大鼠、小鼠)抗體IgG大鼠高敏狀腺素(U-T4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
牛蒡子苷元 分析標準品,>98% Anti-GAPDH/FITC 熒光素標記3-甘油脫氫IgG大鼠高敏狀腺原氨(U-T3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
牛蒡子苷 分析標準品,>98% Anti-GAPDH/FITC 熒光素標記3-甘油脫氫抗體IgG大鼠紅衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
馬兜鈴 分析標準品,>98% Anti-Gastrin/FITC 熒光素標記胃泌素/蛙皮素抗體IgG大鼠尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異補骨脂素 分析標準品,>98%Anti-Gastrin/FITC 熒光素標記胃泌素/蛙皮素抗體IgG大鼠尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
桃葉珊瑚苷 分析標準品,≥98%Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3/FITC 熒光素標記蛙皮素受體3抗體IgG大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
白樺脂 分析標準品,>98%Anti-GATA-3/FITC 熒光素標記抗GATA結(jié)合蛋白3抗體IgG大鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
(+)- 分析標準品,≥98% (GC)Anti-GATA-4/FITC 熒光素標記抗GATA結(jié)合蛋白4抗體IgG大鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
巖白菜素 分析標準品,>98% Anti-GATA-5/FITC 熒光素標記抗GATA結(jié)合蛋白5抗體IgG大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/KDR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雙去氧姜黃素 分析標準品,>98% Anti-GATA-6/FITC 熒光素標記抗GATA結(jié)合蛋白6抗體IgG大鼠血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
野百合堿 分析標準品Anti-Gax/FITC 熒光素標記生長終止特異性同源盒因抗體IgG大鼠血管活性腸肽(VIP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
白屈菜紅堿 分析標準品,>98% Anti-GCK/FITC 熒光素標記抗葡萄糖激抗體IgG大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
木香烴內(nèi)酯 分析標準品,>98%Anti-GCN2/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠蛋白激GCN2蛋白抗體IgG大鼠V-Fos FBJ骨髓瘤病癌因同源物(FOS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二氫丹參酮 分析標準品,≥98%Anti-Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白抗體IgG大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病癌因同源物(HRAS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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